ANÁLISIS EN LA COMPOSICIÓN EN PROTEINASAS DEL VENENO DE YARARÁ GRANDE MEDIANTE EMPLEO DE INHIBIDORES Y ANTICUERPOS TOXINO-ESPECIFICOS

VAN DE VELDE, ANDREA CAROLINA; GAY, CLAUDIA CAROLINA; .LEIVA, LAURA CRISTINA

Mar del Plata

Congreso; XLV REUNIÓN CIENTÍFICA ANUAL Sociedad Argentina de Farmacología Experimental; 2013

Sociedad Argentina de Farmacología Experimental

Bothrops alternatus (yarará grande) es una especie ampliamente distribuida en la región Noreste del país, siendo la causante más frecuente de accidentes ofídicos. La intoxicación botrópica provoca proteólisis de tejidos, hemorragia y trastornos de la hemostasia, y es debida principalmente a dos tipos de proteinasas: serino (SP) y metaloproteinasas (MP), ambas detectadas en este veneno. Las MP de Venenos de Serpientes (MPVS) representan el 50% de su composición, constituyendo blancos relevantes para el desarrollo de nuevos agentes terapéuticos. Estudios previos llevados a cabo con anticuerpos específicos contra una MPVS hemorrágica perteneciente a la clase PIIIb (baltergina), mostraron que las IgGs anti-baltergina son capaces de neutralizar totalmente la actividad hemorrágica y parcialmente la actividad coagulante que exhibe esta secreción ofídica. En este trabajo se estudió la habilidad de estas IgGs en neutralizar la actividad proteolítica. Se incubó el veneno con diferentes concentraciones de IgGs (relación mg veneno/mg IgG: 1/50, 1/25 y 1/14) y se midió la actividad caseinolítica residual sobre azocaseina (5 mg/mL), empleando como control 100% veneno/PBS. Se detectó una actividad residual de 32 ± 2%, 31 ± 3% y 42 ± 3% respectivamente frente al control. Paralelamente se realizó el mismo ensayo preincubando veneno con inhibidor de MP (EDTA-Na2, 5mM) y de SP (PMSF, 5 mM). El EDTA-Na2 mostró una actividad residual menor al 1% respecto al control, mientras que PMSF redujo ligeramente la actividad proteolítica del veneno (89%). Los estudios con inhibidores demuestran que las MPVS son las principales responsables de la proteólisis inducida por el veneno, usando azocaseína como sustrato, mientras que los ensayos con anticuerpos toxinoespecíficos, con una neutralización parcial del 70 %, evidencian la presencia de MP pertenecientes a una clase distinta de las PIII, posiblemente del tipo PI, que exhiben actividad proteolítica y baja o nula actividad hemorrágica.