Citotoxicidad sobre línea celular tumoral inducida por una metaloproteasa aislada del veneno de Bothrops alternatus

BUSTILLO SOLEDAD; LUCERO HORACIO; GAY CLAUDIA C.; BAL DE KIER JOFFÉ ELISA; GORODNER JORGE O.

Otro; Reunión de Comunicaciones Científicas y Tecnológicas 2006. http://www.unne.edu.ar/Web/cyt/com2006/index.htm; 2006

Secretaría General de Ciencia y Técnica - UNNE

Los venenos de serpientes son una amplia fuente de serino-proteasas y metaloproteasas que inducen una variedad de efectos toxicos tales como hemorragia, agregación plaquetaria y coagulacion sanguínea. Los ensayos de cultivo celular in vitro han resultado importantes herramientas para determinar la cronología de los eventos que resultan en la muerte de la célula y para estudiar mecanismos generales. Se ha demostrado que proteínas presentes en venenos ofídicos (L-amino acid oxidasas, metaloproteasas, desintegrinas, etc) son capaces de desencadenar la apoptosis de células normales y cancerígenas. En este trabajo se analizó la actividad citotóxica sobre la línea celular tumoral mamaria murina LM3, de una metaloproteasa con actividad hemorrágica presente en el veneno de Bothrops alternatus (víbora de la cruz), una de las principales especies responsables de los accidentes que ocurren en la Argentina. Las células fueron expuestas a la enzima por 4 hs y se midió la viabilidad celular utilizando el colorante Cristal Violeta. Se observó que la metaloproteasa posee un efecto citotóxico dependiente de la dosis a partir de concentraciones superiores a 10 µg/ml. Las células expuestas mostraron cambios en su morfología normal y se observaron zonas con desprendimiento de la monocapa. Los cultivos incubados con altas concentraciones de enzima (200 y 2000 µg/mL), mostraron agregaciones densas irregulares con condensación del contenido celular, sugiriendo eventos de fusión celular. En conclusión, la metaloproteasa aislada del veneno de B. alternatus posee un marcado efecto citotóxico, dosis dependiente, sobre la línea celular tumoral mamaria murina, LM3. La muerte celular es objeto de numerosas investigaciones y el interés se en el campo de la oncogénesis, abriendo la posibilidad de una potencial aplicación farmacológica.