Aislamiento y caracterización de una hemorragina acídica del veneno de Bothrops alternatus.

GAY CLAUDIA C.; MARUÑAK SILVANA L.; LEIVA LAURA C.; ACOSTA DE PÉREZ OFELIA C.

Resistencia

Otro; Reunión de Comunicaciones Científicas y Tecnológicas 2004. http://www.unne.edu.ar/unnevieja/Web/cyt/com2004/index.htm; 2004

Secretaría General de Ciencia y Técnica - UNNE

La intoxicación provocada por veneno de ofidios del género Bothrops (yarará) se caracteriza por lesiones locales y sistémicas. En el caso de Bothrops alternatus (víbora de la cruz), una de las principales especies responsables de los accidentes que ocurren en la Argentina, los efectos locales son marcados. En las intoxicaciones por  ofidios del género Bothrops el sangrado se debe a la acción sinérgica de enzimas del tipo trombina (thrombin-like) que consumen el fibrinógeno plasmático por coagulación directa y de hemorraginas, metaloproteinasas dependientes de zinc. En este trabajo se llevó a cabo el aislamiento y caracterización parcial de una proteasa con actividad hemorrágica presente en el veneno de Bothrops alternatus que habita la región nordeste de Argentina. El perfil de elusión cromatográfica correspondiente a la primera etapa de purificación (DEAE-Celulosa) mostró cuatro picos. Se detectó marcada actividad proteolítica y hemorrágica en los picos I (correspondientes a proteínas básicas), III y IV (correspondientes a proteínas acídicas); encontrándose la enzima de interés en el más acídico. Las fracciones del último pico fueron sometidas a cromatografía de filtración por gel y se obtuvieron 2 fracciones, la IVa  presentó  mayor actividad hemorrágica, y corresponde a una proteína de 55 kDa, que constituye la hemorragina en estudio. La dosis hemorrágica mínima (DHM) de la enzima aislada es de 1.9 μg. Además, se detectó inhibición total de la misma en presencia de  EDTA lo que confirma la naturaleza metal-dependiente. Posee actividad α-fibrinógenolítica, sin embargo mostró débil actividad β- fibrinógenolítica y no hidrolizó a la cadena γ del fibrinógeno en el tiempo ensayado. La dosis edematizante mínima (DEM) fue de 1,3 µg, la cual resulta menor que la que posee el veneno entero. Las actividades exhibidas por esta enzima ponen en evidencia la elevada toxicidad que la misma posee ya que presenta capacidad de inducir hemorragia local y de degradar factores de la coagulación, lo que desencadenaría un proceso inflamatorio e hipoxia tisular que conllevarían a otros daños tisulares.