EVALUACIÓN DEL PERFIL PROTEICO Y MORFOLÓGIA DE ACTINOMUCOR ELEGANS LBM 239 CULTIVADO CON CARBENDAZIM

BELARDITA AGUSTÍN ALFREDO; BAUMANN JEANNETTE ALICIA; DÍAZ, GABRIELA VERÓNICA

Posadas

Jornada; Primeras Jornadas Institucionales INBIOMIS; 2022

Las prácticas agrícolas representan una parte importante de la economía en la provincia de Misiones. Los productores utilizan distintos tipos de agroquímicos para el control de las malezas y plagas que afectan su producción. El Carbendazim es un fungicida sistémico ampliamente utilizado para controlar enfermedades fúngicas en los cultivos. Su uso creciente y sus graves efectos tóxicos sobre una multiplicidad de seres vivos se consideran una amenaza cada vez mayor para el equilibrio ecológico del medio ambiente. Los hongos se encuentran entre los principales agentes de degradación de los productos agroquímicos. Previamente, el grupo de investigación aisló de muestras de suelo hortícola de Misiones a Actinomucor elegans LBM 239 tolerante al Carbendazim a una concentración de 100 ppm.El objetivo de este trabajo fue caracterizar los efectos tóxicos del fungicida Carbendazim sobre el perfil proteico y la morfología de A. elegans LBM 239. Las proteínas se obtuvieron de los sobrenadantes de A. elegans cultivado en medio Czapek suplementado, al cual se adicionó un volumen de Carbendazim con una concentración igual a 100 ppm. Se incubó junto con su control a 28 °C durante diez días en condiciones estáticas. Los sobrenadantes, libres de micelio, se obtuvieron por filtración al vacío, centrifugación y clarificación. De cada muestra se utilizó un volumen de sobrenadante que contenga 40 µg de proteínas para continuar con el protocolo de reducción-alquilación y precipitación con acetona. Los precipitados proteicos se enviaron a analizar por espectrometría de masa. Para estudiar el efecto del Carbendazim sobre la morfología macro y microscópica, el hongo se cultivó en medio extracto de malta líquido con y sin el fungicida durante catorce días. Se evaluaron los cambios en el micelio fúngico mediante observación visual directa y por microscopía electrónica de barrido.Se identificaron un total de 30 proteínas, destacándose la presencia de proteínas relacionadas con la respuesta al estrés oxidativo como la Cu/Zn superóxido dismutasa y la subunidad beta de proteína G señalizadora únicamente en la muestra del hongo en crecimiento con Carbendazim. En relación a los efectos sobre la morfología, a nivel macroscópico, se observó una inhibición del crecimiento del micelio en presencia de Carbendazim, mientras que el análisis estadístico sobre las imágenes de microscopía electrónica, permitió determinar que las hifas expuestas al medio con Carbendazim presentaron un diámetro significativamente menor que las hifas del control (p < 0,05). Por otro lado, no se observaron diferencias significativas en el diámetro de esporas. A pesar de la tolerancia del hongo al Carbendazim, se evidenciaron los efectos tóxicos del fungicida en el perfil proteico resultado del estrés oxidativo y en su morfología.La capacidad de A. elegans LBM 239 para desarrollarse en presencia de Carbendazim y la contribución al esclarecimiento de los mecanismos involucrados en esta tolerancia constituyen un primer paso para la evaluación del potencial de este organismo como biorremediador de suelos contaminados con este fungicida.