DISEÑO Y PRODUCCION DE UN KIT DE DIAGNOSTICO SEROLOGICO DE HIDATIDOSIS EN HOSPEDEROS INTERMEDIARIOS

SERAFINO, JUAN; GALLO CALDERON, MARINA; JENSEN, OSCAR; LARRIEU EDMUNDO; POGGIO, THELMA VERONICA

Jornada; XL Jornadas Internacionales de Hidatidosis ? XXXII Jornadas Nacionales de Hidatidosis, Tandil, provincia de Buenos Aires, Argentina; 2017

Asociacion Parasitologica Argentina

IntroducciónNo existe en el mercado disponibilidad de equipos de diagnóstico serológico de Echinococcus granulosus para uso en ovinos y caprinos. El análisis del genoma de E granulosus muestra que la familia de proteínas de 8-kDa del Ag B está compuesta de un número de variantes ampliamente distribuidas y con reactividad cruzada entre las tenias. No obstante, algunas variantes de la proteína de 8-kDa pueden ser usadas para el diagnóstico específico de infecciones por metacestodos.ObjetivoDesarrollar y validar nueva tecnología diagnostica para detección de anticuerpos contra antígenos de E granulosus en ovinos y caprinos por inmunoinmunoanalisis.Materiales y MétodosLa proteína recombinante de 8-kDa fue expresada como cuerpos de inclusión, purificada y caracterizada inmunológicamente. Para estandarizar la técnica y verificar parámetros de validación de acuerdo con el Manual de la OIE se desarrolló un panel de sueros control a partir de muestreos de ovinos de zonas endémicas, libres de la enfermedad, y de animales involucrados en pruebas con descarga del parásito colectados durante los ensayos con la vacuna Providean Hidatil EG95®. Resultados Se concluyó la etapa de estandarización de la técnica para diferenciar animales infectados experimentalmente y naturalmente infectados, de animales no infectados. Se observo un minimo grado de reactividad cruzada con otros agentes relacionados y se eliminó la potencial interferencia con animales vacunados. Se verificó el desempeño analítico de la técnica con resultados q cumplen con los criterios de aprobación fijados.Conclusiones Se han completado las etapas de clonado, expresión y purificación del antígeno 8-kDa recombinante y, estandarización y validación. El método de detección serológica sensibilizando con un antígeno recombinante podría ser usado satisfactoriamente para reemplazar al líquido hidatídico eliminando el uso de material infectivo y la variabilidad de lotes.