Viabilidad de linfocito bovinos expuestos a clorpirifos+cipermetrina

DANIELA M FERRÉ; VALERIA LENTINI; R LUDUEÑA; GORLA, NORA B. M.

Mendoza

Jornada; X Jornadas de Investigación UMaza 2018; 2018

Universidad Juan Agustin Maza

La problemática actual en inocuidad alimentaria radicaen la posible exposición de la población a múltiplesprincipios activos a través de los alimentos. Clorpirifos(CPF) y Cipermetrina (CIP) son los plaguicidas que seutilizan tanto en producción de frutas y hortalizas comoen producción de bovinos de carne en Mendoza. Existennumerosas evaluaciones de toxicidad en formaindividual, pero pocas que consideran la exposicióncombinada de estos compuestos para valuar su potencialgenotóxico; y para ello es necesario establecera priori dosis no citotóxicas de trabajo. El objetivo deltrabajo fue evaluar la citotoxicidad de CPF y CIP sobrelinfocitos bovinos cultivado in vitro. Se realizó el ensayode viabilidad con azul tripán (Sigma modificado) sobrelinfocitos bovinos. Se obtuvo sangre de la vena yugularde una macho raza Aberdeen Angus, castrado y en óptimascondiciones de salud, se separaron los linfocitosmediante solución histopaque (Sigma) y centrifugación.Se observaron en microscopio óptico sobre cámara deNeubauer. Se utilizó CPF (Sigma) y CIP (Chemotécnica)disueltos en DMSO. Se realizaron dos ensayos sobrecultivos celulares en medio RPMI, junto a cultivoscontroles negativos para cada caso con DMSO. Loscultivos se efectuaron por duplicado, al igual que losconteos celulares. En el ensayo 1, los linfocitos fueronexpuestos desde el inicio y por 4,5 h a las siguientesconcentraciones= 0,02mg/ml; 0,01mg/ml, 0,005mg/ml; 0,0025mg/ml y 0,00125mg de CPF/ml de cultivo celular;las mismas concentraciones se usaron para CIP.En el ensayo 2, los linfocitos fueron expuestos desde elinicio y por 3,5h a las concentraciones 0,16 mg/ml; 0,08mg/ml, 0,04 mg/ml; 0,02 mg/ml y 0,01 mg/ml de CPF/mlde cultivo celular; las mismas concentraciones se usaronpara CIP. Los porcentajes de viabilidad de los linfocitosexpuestos a CPF en el ensayo 1 oscilaron entre64 y 84%, y el control negativo 87%; y en el ensayo 2 seobtuvo una viabilidad celular entre 88 y 93%, y el controlnegativo 89%. Los porcentajes de viabilidad de los linfocitosexpuestos a CIP en el ensayo 1 se presentaronen el rango entre 66 y 73%, y el control negativo 83%;y en el ensayo 2 entre 88 y 92%, y el control negativo94%. Ninguna de las concentraciones ensayadas sobrelos cultivos de linfocitos presentó viabilidad celular inferioral 50%, valor considerado límite para determinarcitotoxicidad. Las dosis más altas ensayadas puedenser consideradas no citotóxicas para linfocitos bovinosy utilizarse en estudios de genototoxicidad in vitro.