EVALUACIÓN DEL EFECTO IN VITRO DE LOS PÉPTIDOS ANTIMICROBIANOS HLF1-11 Y P113 SOBRE LEISHMANIA BRAZILIENSIS

CASASCO A; ALLIANI B; PALMA MB ; FRANK FM; PETRAY PB

Santa Fe

Congreso; XXVIII Reunión de la Sociedad Argentina de Protozoologia; 2016

SAP

La Leishmaniasis es una enfermedad de alta prevalencia en regiones tropicales y subtropicales del mundo con un gran aumento de su incidencia en los últimos años. El tratamiento recomendado basado en el uso de antimoniales pentavalentes posee limitaciones relacionadas con toxicidad y resistencia del parásito. En la búsqueda de alternativas terapéuticas, los péptidos antimicrobianos (PAMs) son candidatos atractivos debido a su actividad microbicida de amplio espectro y su función inmunomoduladora. Péptidos derivados de histatina 5 (P113) y lactoferrina (hLF1-11) humanas han sido desarrollados por la industria farmacéutica para uso clínico en infecciones bacterianas y fúngicas, aún para aplicaciones tópicas. Nuestro objetivo fue evaluar la eficacia in vitro de estos PAMs frente a Leishmania. Promastigotes de L. braziliensis fueron incubados por 48 h en presencia de P113 o hLF1-11 (0-100µg/ml) a fin de determinar la IC50. Macrófagos RAW 264.7 (MØ, 5x105/ml) fueron infectados por 24 h con promastigotes (1:10) y tratados inmediatamente durante 48 h con hLF1-11 o P113 (100µg/ml) incluyéndose controles sin tratar (C). Los MØ fueron teñidos con Wright-Giemsa y se determinó la tasa de infección por evaluación microscópica. Se cuantificaron los niveles de óxido nítrico en los sobrenadantes por reacción de Griess. Se determinó la citotoxicidad de los PAMs sobre la célula hospedadora cultivando los MØ sin infectar en presencia de hLF1-11 o P113 (0-1000µg/ml). El tratamiento con los PAMs redujo la viabilidad de los promastigotes con un valor de IC50= 3,07 (hLF1-11) y 0,34 µg/ml (P113) lo que se vio reflejado en cambios morfológicos. Se observó una reducción del N° de amastigotes/ MØ tanto para hLF1-11 (p<0,001) como para P113 (p<0,01), registrándose una actividad antiamastigote de 69,15 ± 5,22 % y 48,43 ± 8,40 % respectivamente. Se halló una disminución del % de células infectadas que resultó altamente significativa para hLF1-11 (p<0,0001). En los sobrenadantes de cultivo, se detectó un aumento de la producción de óxido nítrico por los MØ en ambos casos (p<0,05). Los PAMs no resultaron citotóxicos para la célula hospedadora a las concentraciones empleadas en los ensayos. Sólo se observó una disminución del 12% de la viabilidad para P113 a 1000µg/ml. Concluímos que estos péptidos sintéticos podrían constituir un atractivo recurso con potencial leishmanicida.