Desarrollo de un metodo para evaluar actividad tripanocida y leishmanicida de plantas medicinales argentinas

FRANK FM,; CAZORLA SI,; S¨¹LSEN V,; REDKO F,; ULLOA J,; COUSSIO J,; MALCHIODI EL,; MUSCHIETTI L,; MARTINO V.

Huerta Grande, Cordoba, Argentina

Congreso; XXI Reunion Anual de Sociedad Argentina de Protozoologia; 2006

Sociedad Argentina de Protozoologia

Los medicamentos empleados actualmente para el control de la enfermedad de Chagas y Leishmaniasis tienen alta toxicidad, baja actividad y resistencia emergente. Por ello, la b¨²squeda de agentes activos es prioritaria. Nuestro objetivo fue desarrollar un m¨¦todo pr¨¢ctico para evaluar la actividad tripanocida y leishmanicida de plantas usadas en la medicina tradicional argentina. Se cultivaron epimastigotes de T. cruzi en distintas concentraciones en medio LIT con presencia de Timidina-H3. Las cuentas por minuto incorporadas se determinaron en un contador beta. Para determinar la sensibilidad del m¨¦todo se compararon cpm incorporados con el recuento en c¨¢mara de Neubauer, obteni¨¦ndose linealidad (r2>0,99) desde 107 hasta 103 par¨¢sitos/ml.  Por otro lado, se cultivaron a distintos tiempos 1,5x106p/ml en presencia de Benznidazol (5 a 20 ¦ÌM) con el agregado T-H3. El mismo protocolo se realiz¨® con Amfotericina B (0,025 a 0,2 ¦Ìg/ml) para promastigotes de Leishmania mexicana. El recuento en c¨¢mara de Neubauer vs cpm mostr¨® una correlaci¨®n significativa (P<0,03), corrobor¨¢ndose inhibici¨®n dosis dependiente para ambas especies. La incorporaci¨®n de T-H3 mostr¨® ser un m¨¦todo sensible, r¨¢pido, certero e independiente de la cepa para la b¨²squeda de nuevas drogas. Empleamos el m¨¦todo desarrollado para el screening de plantas medicinales argentinas. De los extractos org¨¢nicos de Ambrosia tenuifolia y Eupatorium buniifolium se aislaron los flavonoides: hispidulina y santina,  que presentaron valores de IC50 de 14,00 y 16,79¦Ìg/ml para T. cruzi y de 2,09 y 22,08¦Ìg/ml para L. mexicana, siendo hispidulina el compuesto m¨¢s activo encontrado. Determin¨¢ndose por primera vez la actividad tripanocida y leishmanicida de estos compuestos.