INVESTIGADORES
FRANK fernanda Maria
congresos y reuniones científicas
Título:
Efecto antiparasítico de la vitamina B12 sobre Trypanosoma cruzi
Autor/es:
LOMBARDO ME; FRANK FM; CICCARELLI AB; BATLLE A
Lugar:
Sheraton Buenos Aires Hotel - Argentina
Reunión:
Congreso; 13 Congreso Internacional de Medicina Interna del Hospital de Clínicas.; 2010; 2010
Institución organizadora:
Facultad de Medicina - Universidad de Buenos Aires
Resumen:
Trypanosoma cruzi, el agente causal de la enfermedad de Chagas, requiere compuestos hémicos para su crecimiento, observándose que tanto la falta como la acumulación del hemo son letales. En este trabajo nuestro objetivo fue investigar el efecto in vitro e in vivo de la vitamina B12 (cianocobalamina), un análogo estructural del hemo, sobre el parásito. La actividad anti-T. cruzi se evaluó in vitro sobre epi- tripo- y amastigotes por conteo del número de parásitos en una cámara de Neubauer e in vivo sobre ratones infectados con tripomastigotes sanguíneos a los que se les monitorea sobrevida y parasitemia. Se observó una marcada actividad inhibitoria de la vitamina B12 sobre el crecimiento de la forma epimastigote (IC50 2,42 ± 0,54 mM) y actividad tripanocida sobre el estadio tripomastigote (IC50 9,46 ± 1,20 mM); ambas actividades resultaron ser 2,5 a 3 veces mayores a las del benznidazol empleado como droga de referencia. Para el estadio amastigote cultivado en células Vero la actividad inhibitoria fue baja, sin afectar la vitamina B12 a concentraciones de hasta 1,2 mM la viabilidad de la célula huésped. La actividad antiparasítica evaluada in vitro  resultó ser independiente de la concentración de hemina (0-30 mg/l) presente en el medio de cultivo y manifestó una respuesta dosis-dependiente frente a una segunda administración de vitamina B12. Al tratar de dilucidar el mecanismo de acción de la vitamina B12 empleando epimastigotes de T. cruzi, observamos por citometría de flujo que la misma incrementa el estado oxidativo intracelular, genera anión superóxido, a la vez que aumenta la actividad de superóxido dismutasa (50 %) y ascorbato peroxidasa (sólo un 20 %) sin modificar la actividad de tripanotiona reductasa (las tres enzimas mencionadas pertenecen al sistema de defensa antioxidante del parásito). Además el empleo de un antioxidante como ditiotreitol (0,5-1 mM) o ácido ascórbico (0,5-1,5 mM) potencia hasta casi 10 veces el efecto antiparasítico de la vitamina B12. En base a estos resultados postulamos que la cianocobalamina ejerce su acción a través de la reducción del cobalto (presente como Co+++ en la vitamina B12) a Co++ y luego el Co++ reduce a) el O2 a anión superóxido, b) el anión superóxido a peróxido de hidrógeno y c) el peróxido de hidrógeno a radical hidroxilo. En base a estos resultados el efecto conjunto de la vitamina B12 (1,5 mg/Kg.día) y ácido ascórbico 1,5 mg/Kg.día) fue evaluado in vivo sobre ratones infectados con T. cruzi. Los ratones tratados mostraron una sobrevida del 100% y una disminución de la parasitemia de hasta el 60% respecto a ratones control infectados no tratados. En conclusión la vitamina B12 actuaría sobre el parásito como un generador de especies reactivas de oxígeno y su administración, conjuntamente con un agente reductor,  podría tenerse en cuenta para nuevas modalidades terapeúticas a emplear en el tratamiento de la enfermedad de Chagas