Efecto antiparastico de la vitamina B12 sobre Trypanosoma cruzi

FRANK FM; CICCARELLI AB; BATLLE A; LOMBARDO ME

Ascochinga, Córdoba, Argentina

Congreso; Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2010

Trypanosoma cruzi requiere compuestos hémicos para su crecimiento, observándose que tanto la falta como la acumulación del hemo son letales. En este trabajo nuestro objetivo fue investigar el efecto in vitro e in vivo de la vitamina B12 (cianocobalamina), un analogo estructural del hemo, sobre el parásito. La actividad anti-T. cruzi se evaluó in vitro sobre epi- tripo- y amastigotes  e in vivo sobre ratones infectados con tripomastigotes sanguíneos a los que se les monitorea sobrevida y parasitemia. Se observó una marcada actividad inhibitoria de la vitamina B12 sobre el crecimiento de la forma epimastigote (IC50 2,42 u 0,54 uM) y actividad tripanocida sobre el estadio tripomastigote (IC50 9,46 ¡À 1,20¦ÌM); ambas actividades resultaron ser 2,5 a 3 veces mayores a las del benznidazol empleado como droga de referencia. Para el estadio amastigote cultivado en c¨¦lulas Vero la actividad inhibitoria fue baja, sin afectar la vitamina B12 a concentraciones de hasta 1,2 mM la viabilidad de la c¨¦lula hu¨¦sped. La actividad antiparas¨ªtica in vitro  result¨® ser independiente de la concentraci¨®n de hemina (0¨C30 mg/l) agregada al medio de cultivo y manifest¨® una respuesta dosis-dependiente frente a una segunda administraci¨®n de vitamina B12. Respecto al mecanismo de acci¨®n de la vitamina B12, observamos por citometr¨ªa de flujo un incremento del estado oxidativo intracelular, generaci¨®n de ani¨®n super¨®xido y aumento de la actividad de super¨®xido dismutasa (50 %) y ascorbato peroxidasa (s¨®lo un 20 %) sin modificar la actividad de tripanotiona reductasa. El empleo de un antioxidante como ditiotreitol (0,5¨C1 ¦ÌM) o ¨¢cido asc¨®rbico (0,5-1,5 ¦ÌM) potencia hasta casi 10 veces el efecto antiparas¨ªtico de la vitamina B12. Con estos resultados postulamos que la cianocobalamina ejerce su acci¨®n a trav¨¦s de la reducci¨®n del cobalto (Co+++ de la vitamina B12) a Co++ y luego el Co++ reduce a) el O2 a ani¨®n super¨®xido, b) el ani¨®n super¨®xido a per¨®xido de hidr¨®geno y c) el per¨®xido de hidr¨®geno a radical hidroxilo. En base a estos resultados el efecto conjunto de la vitamina B12 (1,5 mg/Kg.d¨ªa) y ¨¢cido asc¨®rbico 1,5 mg/Kg.d¨ªa) fue evaluado in vivo sobre ratones infectados con T. cruzi. Los ratones tratados mostraron una sobrevida del 100% y disminuci¨®n de la parasitemia de hasta el 60% respecto a ratones control infectados no tratados. En conclusi¨®n la vitamina B12 actuar¨ªa como un generador de especies reactivas de ox¨ªgeno y su administraci¨®n, conjuntamente con un agente reductor, podr¨ªa tenerse en cuenta para nuevas modalidades terape¨²ticas a emplear en la enfermedad de Chagas.