Salmonella thyphimurium como carrier del gen de Cruzipaína genera una respeusta protectiva contra T. cruzi.

CAZORLA SI; BECKER P; DELETTIERES D; FRANK FM; CORRAL RS; MALCHIODI EL; GUZMAN CA

Mendoza

Congreso; VII Congreso Arg. de Protozoología y Enf. Parasitarias; 2005

Sociedad Argentina de Protozoología

Recientemente demostramos que la inmunización con cruzipaína (Cz) y  oligodeoxinucleótidos con motivos CpG, es capaz de conferir protección contra la infección aguda con tripomastigotes sanguíneos de Trypanosoma cruzi. T. cruzi usa como puerta de entrada piel y mucosas por lo que  la generación de   inmunidad de mucosas y sistémica constituye una prioridad que puede alcanzarse por la administración de una vacuna por vía de mucosas.  Para ello se probaron dos estrategias: 1- el uso de un  nuevo adyuvante de mucosas: MALP-PEG ( Macrophage-activating lipopeptide), y 2- Salmonella entérica serovar typhimurium atenuada como carrier de DNA de cruzipaína (St Cz). Para ello el fragmento 1440 pb amplificado por PCR correspondiente a la cruzipaína y clonado en el pCDNA 3.1 fue usado para transformar  dicha  Salmonella. Se inmunizaron grupo de ratones con  GI- St cz, GII- St Cz + St como carrier de GM-CSF, GIII- St Cz + refuerzo de Cz recombinante y CpG GIV- St Cz + refuerzo de Cz recombinante y MALP-PEG y GV- St sin transformar. Quince días posteriores a la última inmunización se extrajo sangre  para determinar título de Ac y células de bazo para estudios de citoquinas. Por Elisa de captura se detectó  Ac IgG totales: GI: 2160±1191, GII: 4.2±0.9x104 GIII: 2.0±0.6x106 GIV: 5.800±2835. Se observó buena respuesta de INF-gama por ELISPOT, con  incrementos  de  GI: 3,  GII: 5, GIII: 9 y GIV: 2 veces, con respecto al grupo control. Otro lote de ratones fue desafiado con 50 tripomastigotes de la cepa RA, y se monitoreo la parasitemia cada 2 o 3 días. En todos los grupos inmunizados se encontró disminución en la parasitemia con respecto al grupo control ( p<0.05). Esta diferencia fue mayor  aún en el grupo inmunizado con St Cz.( p<0.001) en el pico de la parasitemia. Estos resultados estarían indicando que ni el GMCSF ni la dosis de refuerzo con proteína recombinante son capaces de mejorar la protección generada por Salmonella como carrier de DNA de cruzipaína.