Generación de una respuesta inmune protectiva contra la infección con T. cruzi.

FRANK FM; CAZORLA SI; MALCHIODI EL

La Plata, Bs As

Congreso; I Cong. Bonaerense de Zoonosis. IV Jor de Zoonosis de la Prov. de Bs As. III Jor Enfermedades Emergentes de la Prov. de Bs As. II Jor de Medio Ambiente, Educación y Zoonosis de la Prov. Bs As. 8/; 2003

El Ag163B6 es  la principal cistein proteinasa de Trypanosoma cruzi, cruzipaína.. Esta enzima es crucial en la vida del parásito ya que participa en el proceso de internalización a células de mamíferos y se ha demostrado que inhibidores enzimáticos específicos interfieren en la invasión celular e inhiben también la replicación intracelular del parásito in vitro. La cruzipaína se acumula en los lisosomas y es secretada en la zona del bolsillo flagelar. A nivel superficial se la puede detectar asociada a membrana en donde sería la responsable de la proteolisis de anticuerpos unidos a la misma y de esta forma participaría en un mecanismo de escape al sistema inmune.  Estas características señalan al Ag163B6 como blanco potencial para inducir una respuesta inmune protectiva contra la enfermedad de Chagas. La resistencia frente    este parásito intracelular involucra mecanismos Th1. Conociendo la capacidad de oligodeoxynucletidos sintéticos conteniendo secuencias CpG (ODN-CpG) en conducir la respuesta hacia la vía Th1, decidimos analizar la habilidad del Ag163B6 más ODN-CpG en inducir inmunoprotección contra el desafío letal con tripomastigotes.  Para ello, ratones C3H fueron inmunizados con: I: PBS; II: Ag + Al(OH)3; III: Ag + ODN-CpG; IV: Ag + ODN no CpG y V: ODN-CpG sólo.  Los grupos II y III mostraron altos títulos de anticuerpos específicos, principalmente IgG1 e IgG2a respectivamente.  Las células de bazo de los ratones del Grupo III presentaron una alta proliferación  y un significativo incremento de IFNγ e IL-2 al ser estimulados con el Ag in vitro.  El desafío con tripomastigotes generó elevadas parasitemias y mortalidad en todos los grupos, excepto en el Grupo III que mostró menores niveles de parásitos en sangre y un 100% de sobrevida a la infección aguda.  Además, demostramos que en los ratones infectados otros antígenos parasitarios, no incluidos en el inmunógeno y por lo tanto nunca vistos antes por el sistema inmune, también mostraron generar una respuesta Th1. Se ha comunicado cruzipaína puede causar daño muscular, nosotros analizamos histológicamente músculo cardíaco y esquelético de los animales inmunizados encontrando hialinizaciones citoplasmáticas, modificación en la arquitectura celular y pequeños focos inflamatorios en cuadriceps de ratones del Grupo II. No se observó ningún tipo de alteración en los tejidos del Grupo III. Más importante aún, los tejidos cardiacos de los animales del Grupo III  que fueron inmunizados y luego sobrevivieron al desafío, fueron similares a ratones normales ya que no se observaron nidos de amastigotes, fibrosis ni focos inflamatorios. Los resultados obtenidos, más otros publicados recientemente, proveen las bases para el diseño de una vacuna anti-T. cruzi la cual podría ser útil no sólo para proteger personas en riesgo de contraer la infección, sino también aliviar o prevenir la respuesta patogénica característica de la enfermedad crónica de Chagas reduciendo o quizás eliminando los  parásitos tisulares en los pacientes infectados. Se ha comunicado cruzipaína puede causar daño muscular, nosotros analizamos histológicamente músculo cardíaco y esquelético de los animales inmunizados encontrando hialinizaciones citoplasmáticas, modificación en la arquitectura celular y pequeños focos inflamatorios en cuadriceps de ratones del Grupo II. No se observó ningún tipo de alteración en los tejidos del Grupo III. Más importante aún, los tejidos cardiacos de los animales del Grupo III  que fueron inmunizados y luego sobrevivieron al desafío, fueron similares a ratones normales ya que no se observaron nidos de amastigotes, fibrosis ni focos inflamatorios. Los resultados obtenidos, más otros publicados recientemente, proveen las bases para el diseño de una vacuna anti-T. cruzi la cual podría ser útil no sólo para proteger personas en riesgo de contraer la infección, sino también aliviar o prevenir la respuesta patogénica característica de la enfermedad crónica de Chagas reduciendo o quizás eliminando los  parásitos tisulares en los pacientes infectados.