Clonación in vitro de plantas de Lotus glaber genéticamente modificadas

F. ESPASANDIN, P. SANSBERRO, L. MROGINSKI

Corrientes, capital

Congreso; Reunión de Comunicaciones Científicas y Técnicas; 2006

SECyT. UNNE

El objetivo del presente trabajo fue desarrollar un procedimiento que posibilite la multiplicación masiva de plantas transgénicas de Lotus glaber portadoras del gen de interés a fin de emplear las mismas en el análisis de la correlación entre la expresión génica y los diferentes elementos de respuestas metabólicas y fisiológicas que se concatenan ante la señal ambiental de salinidad (estrés osmótico). Se utilizaron fragmentos foliares extraídos de plántulas obtenidas por la germinación in vitro de semillas de una población mejorada por selección recurrente (INTA-PAMPA), fueron transformados mediante infección con el vector binario pBiRD29A-ADC de Agrobacterium tumefaciens, portador del gen de la arginina descarboxilasa (ADC) de avena, bajo el control del promotor inducible RD29A; conteniendo además como marcador selectivo, el gen nptII codificante de neomicina transferasa, siguiendo la metodología desarrollada por Espasandín et al. (2006). Transcurridos 45 días de cultivo, los brotes neoformados que contenían el transgen fueron separados del cluster original, divididos en segmentos uninodales y subcultivados individualmente en tubos que contenían 3 mL de la solución basal de Murashige y Skoog(1962), semisólido (agar 0.65 %), adicionado con sacarosa (30 g L), con o sin el agregado de ácido indolacético (AIA:0.1 mg L) y benciladenina (BA: 0.5, 1, 2 mg L