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El biofilm se puede definir como una comunidad de células bacterianas adherida a una superficie y envueltas en una matriz extracelular producida por ellas mismas. La matriz extracelular o slime está compuesta principalmente por agua e hidratos de carbono. Esta forma de desarrollo permite resistencia a condiciones adversas del medio, a agentes antimicrobianos, desinfectantes y germicidas. Streptococcus equi subsp. zooepidemicus (S equi sbsp. zooepidemicus) es el patógeno oportunista aislado con mayor frecuencia de procesos endometriales en yeguas. La posibilidad de desarrollo en forma de biofilm podría explicar la permanencia de la bacteria en mucosas y el progreso como patógeno ante cambios ambientales. El objetivo de este trabajo fue la evaluación de biofilm de S equi sbsp. zooepidemicus de manera cualitativa y cuantitativa. Se utilizaron 13 muestras de S equi sbsp zooepidemicus aisladas previamente de endometritis en yeguas. Se desarrolló un método cualitativo en portaobjetos, se generó un inóculo con un cultivo over nigth diluido 1/10 en medio fresco, se colocó 1 mL de esa dilución sobre un portaobjeto nuevo y estéril. Cada uno se incubó dentro de una placa de Petri estéril a 37ºC en atmósfera enriquecida con CO2 durante 24 horas. Luego se realizaron 2 lavados con agua destilada estéril, se fijó con metanol y se tiñeron los portaobjetos con Alcian Blue al 2% durante 10 minutos y luego se agregó Cristal Violeta al 4% por 30 segundos. Se observaron en microscopio óptico la adherencia bacteriana, la agrupación y la presencia de PSE. El método cuantitativo se realizó ajustando el inóculo a una turbidez correspondiente al 1 de Mc Farland. Luego se sembraron 200ul de cada inóculo en placas de 96 pocillos de fondo plano (Nunc Maxisorp), se incubaron por 24horas a 37°C en atmosfera enriquecida con CO2 y luego se realizaron 3 lavados con agua estéril y se coloreo el biofilm formado con Cristal Violeta al 1% por 15 minutos. Se repetieron los lavados y el colorante adherido se solubilizó con alcohol 96° y se midió por espectofotometria a 570nm. Por ambas técnicas se logró observar la capacidad de S equi sbsp. zooepidemicus para producir biofilm. El método cualitativo reveló una agrupación en cadenas formando aglomerados de distintos tamaños y con la presencia de polisacárido extracelular. El método cuantitativo permitió clasificar a las cepas en altas productoras de biofilm, de producción media o baja. El 71,4% de las cepas fue categorizada como alta productora de biofilm, en tanto que el 28,6% restante fue clasificada como medianamente productoras. Se demostró la producción de biofilm por ambas técnicas. Esto evidencia una versatilidad de la bacteria para desarrollar biofilm en distintas superficies inertes. Por el método cuantitativo se pudo apreciar que la mayoría de los aislamientos estudiados son altamente productores de biofilm. Esta alta capacidad, tiene un rol en la supervivencia de la bacteria, permitiéndole permanecer en diferentes mucosas y ser más resistente a diferentes tratamientos, inclusive lavajes uterinos con antimicrobianos. Por lo tanto, el conocimiento del proceso de formación de biofilm y la búsqueda de inhibidores del mismo podrían prometer una atractiva vía para la prevención y tratamiento de enfermedades que involucren este proceso.

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