Identificación de marcadores moleculares ligados a la apomixis en Paspalum notatum

MARTÍNEZ, ERIC J.; ORTIZ, JUAN PA; HOPP, HORACIO E.; QUARIN, CAMILO L.

Rosario, Santa Fe, Argentina

Congreso; XXIX Congreso Argentino de Genética, III Jornada Chileno-Argentina de Genética, 32 Congreso de Genética de Chile; 1999

Sociedad Argentina de Genética y Sociedad de Genética de Chile

La apomixis es un sistema de reproducción asexual de algunos vegetales. El embrión de las semillas es de exclusivo origen materno y lleva el mismo genotipo. El carácter es de importancia agronómica debido a que su introducción en las especies cultivadas permitiría la propagación, por semillas, de genotipos superiores e híbridos. La caracterización e identificación de los genes responsables de la apomixis es un requisito necesario para la transferencia del carácter a las especies cultivadas. El objetivo de este trabajo fue la identificación de marcadores moleculares ligados a la apomixis en Paspalum notatum. Se realizó un cruzamiento entre un individuo tetraploide sexual y uno apomíctico y se obtuvo una progenie F1 segregante. Los individuos F1 fueron clasificados embriológicamente en sexuales y apomícticos mediante la técnica de clarificado de ovarios y observación de los sacos embrionarios mediante microscopio con contraste de interferencia diferencial. Para la identificación de marcadores moleculares ligados a la apomixis se recurrió a la metodología de análisis de segregantes en grupos (bulked segregant analysis, BSA). Los experimentos se realizaron empleando ADN de los progenitores y de 98 individuos de la progenie (50 sexuales y 48 apomícticos). Los grupos a comparar (sex y apo) se formaron incluyendo 10 individuos en cada uno. Se emplearon marcadores moleculares RAPD para la detección de bandas diferenciales entre los grupos. Se ensayaron 400 iniciadores (primers) de la serie British Columbia University (juegos 1, 3, 4 y 5). El 85% de los iniciadores (341) generaron productos de amplificación que no mostraron diferencias entre los grupos y 57 (14,25%) no amplificaron el ADN genómico u originaron un patrón difuso sin bandas identificables. Sin embargo, sobre un total de cerca de 1700 loci evaluados, dos fueron diferenciales entre los grupos. En ambos casos se trató de un fragmento presente en el grupo apomíctico y ausente en el sexual. Los marcadores detectados fueron confirmados ensayándolos con ADN de los progenitores de la población segregante y los 98 individuos seleccionados de la progenie. En los dos casos los marcadores detectados evidenciaron una alta cosegregación con la apomixis. Las frecuencias de recombinación entre los fragmentos diferenciales y el carácter en estudio fueron de 3,1% para un marcador y de 2,0% para el otro. Estos resultados indican que los fragmentos detectados están fuertemente ligados al carácter y que pueden ser empleados para la discriminación de plantas apomícticas y sexuales. Asimismo se espera que el aislamiento y clonado de los fragmentos identificados permita la utilización de los mismos en estrategias tendientes a localizar la región genómica relacionada con el carácter apomixis en Paspalum.