Perfil proteómico de Acanthamoeba spp. Genotipo T4, aislados del río Vaqueros, Salta, Argentina

DIEGO GASTÓN SANGUINO JORQUERA; IRAZUSTA, VERÓNICA PATRICIA; RAJAL, VERONICA BEATRIZ; MARÍA MERCEDES JUÁREZ

Salta

Jornada; VIII Jornadas de la Facultad de Ciencias Naturales, VI Jornadas de Enseñanza de las Ciencias Naturales, II Jornadas de la Unidad Integrada INTA-UNSa; 2017

La presencia de amebas del género Acanthamoeba en ambientes recreativos cobra importancia por su capacidad de comportarse ocasionalmente como parásito humano causante de encefalitis granulomatosa amebiana, queratitis acantamebiana y/o acantamebiosis cutánea. Los objetivos de este trabajo fueron: evaluar el crecimiento celular en distintas condiciones de cultivo, con y sin α-D-manopiranosido (MP), y estudiar el perfil de proteínas totales de las amebas en las condiciones ensayadas para su crecimiento. Previamente los aislamientos se obtuvieron a partir de 20 litros de aguas del río Vaqueros concentradas por ultrafiltración (400 X), y los aislados fueron genotipificados usando secuenciación de un fragmento conservado del ADNr 18S. Los cultivos se realizaron en medio PPYG (proteosa peptona, extracto de levaduras y glucosa) con y sin MP, cuantificando el inóculo y el crecimiento final en cámara de Neubauer. Las proteínas totales se obtuvieron por ruptura mecánica con arena. Los perfiles de proteínas se visualizaron en geles de poliacrilamida empleando tinción con nitrato de plata, y para su análisis se utilizó el software GelQant.NET comparándose con una cepa control. El aislado KY751412 y el control mantuvieron la relación trofozoítos-quistes luego de proliferar en ambas condiciones, mientras que para el aislado KY751414 esto se cumplió solo para la condición sin MP. Para este último el crecimiento con MP fue en mayor medida a expensas de quistes. Se necesitan mayores estudios de esta respuesta, ya que el proceso de enquistamiento depende de diversos factores. Se observó un gran número de bandas constitutivas en todos los perfiles proteicos. No se visualizaron bandas que correspondieran a proteínas sintetizadas diferencialmente entre condiciones, pero sí bandas únicas en KY751414, con un peso molecular ~45 kDa. La presencia de bandas con peso molecular entre 40 y 45 kDa podría relacionarse con la síntesis de proteínas citolíticas.