Caracterización de la actividad B-glucosidasa frío-activa por métodos sensibles y rápidos.

HECTOR A. CRISTOBAL

Tucumán, Argentina

Jornada; XIII Jornadas Jovenes Investigadores de AUGM.; 2005

AUGM

Los microorganismos psicrofilos y/o psicrotolerantes capaces de degradar polisac¡§¢ridos tal como la celulosa y celobiosa son de gran interes para la industria biotecnológica. El colorante rojo congo muestra una fuerte interacción con polisac¡§¢ridos que presentan uniones b-(1a4) D-glucopiran¡§®sidos; permitiendo determinar actividades b-D-Glucanasas empleando un substrato específico en placas. La producción de b-D-glucosidasa por la especie Shewanella sp. G5 fue ensayada en placas con celobiosa e incubadas a 4 y 20 ºC. Las placas fueron teñidas con rojo congo, se lavo con cloruro de sodio y ácido cítrico. Por otro lado se emplearon dos substratos an¡§¢logos (4MUbG y PNPG) para determinar la especificidad de la enzima. Resultados obtenidos con rojo congo muestran una zona clara alrededor de las colonias debido a la actividad b-glucosidasa por la degradaci¡§®n de celobiosa. Los substratos:  4MUbG y PNPG permitieron detectar actividades positivas en las colonias aisladas, observandose fluorescencia a la luz UV y coloración amarilla, respectivamente. Palabras claves: b-D-Glucosidasa, psicrofilos