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Los bifenilos policlorados (PCBs) son compuestos altamente contaminantes debido a su carácter recalcitrante y ecotoxicidad. Aunque su producción y comercialización han sido prohibidas hace cuatro décadas todavía persisten en el medio ambiente representando un problema ambiental de gran importancia. Las técnicas disponibles actualmente para la descontaminación de matrices con PCBs representan enfoques exigentes desde el punto de vista técnico y financiero. Así el uso de microorganismos para degradar estos contaminantes se presenta como una alternativa económica y poco invasiva para el ambiente a remediar. Numerosos trabajos han demostrado la capacidad de los denominados hongos de pudrición blanca de degradar con éxito diferentes congéneres de PCBs. Sin embargo, se sabe poco acerca de las enzimas, los mecanismos y las vías metabólicas involucradas en la degradación. En este sentido nuestro grupo de trabajo ha seleccionado la cepa Pleurotus sajor-caju LBM 105 autóctono de Misiones debido a su capacidad de tolerar y degradar altas concentraciones de PCBs. Continuando en la misma línea de investigación, se planteó como objetivo obtener y analizar el secretoma del hongo de pudrición blanca P. sajor caju LBM 105 en presencia del contaminante y compararlo con el secretoma del mismo en ausencia del xenobiótico. Para lograrlo P. sajor caju LBM 105 se desarrolló en un medio de cultivo deficiente de nitrógeno con glucosa-asparagina tanto en presencia como en ausencia de una solución de aceite de transformador (10 ppm) compuesto de los Aroclores 1242, 1254 y 1260. El hongo se incubó a 28°C en condiciones estáticas y se tomaron muestras del sobrenadante de cultivo a los 7, 14 y 21 días del cultivo. Estos sobrenadantes se clarificaron mediante un filtro de 0,22 µm, luego fueron reducidos y alquilados, usando una solución de Ditiotreitol 10 mM y una solución de Iodoacetamida 20 mM respectivamente. La precipitación se realizó con ácido tricloroacético a -20°C durante 2 h, luego se centrifugó y el pellet obtenido se lavó tres veces con acetona fría. Para identificar las proteínas secretadas en estas condiciones se recurrió a analizar el secretoma mediante la metodología de nano LC MS/MS, comparándolo con el genoma de Pleurotus ostreatus y usando el programa Proteome Discoverer (Cequibiem, FCEN, UBA, Argentina). Mediante esta aproximación, se pudo observar que las enzimas más representadas en condiciones de degradación fueron las proteasas y las enzimas oxidoreductasas, con una mayor presencia de las enzimas lacasas. Además, se vio un cambio en las isoformas de las enzimas lacasas en presencia de los bifenilos policlorados. Estas isoformas de lacasas podrían tener una mayor afinidad por el contaminante, así como ser inducidas por el mismo, pudiendo cumplir un rol crucial en la remoción del xenobiótico por parte del hongo.

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