AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE PANUS STRIGELLUS NATIVO DE LA RESERVA DE SAN RAFAEL

GONZALEZ CORIA, JC; DAMUS MELGAREJO, ME; BICH, GA; CASTRILLO, ML

Modalidad virtual

Conferencia; V Encuentro de Investigadores Sociedad Científica del Paraguay; 2020

Introducción: La Reserva de San Rafael exhibe una amplia diversidad de ambientes, en la cual, su exploración fúngica sigue siendo limitada. En la actualidad, la conservación del ambiente nativo resulta fundamental, ya que es un hecho de que el medio ambiente se está degradando a causa de las actividades humanas. Los hongos cumplen un rol fundamental en la regulación de los procesos ecológicos y en la biosíntesis de metabolitos secundarios. Objetivo: El objetivo del presente trabajo fue aislar, identificar y conservar una cepa de hongo nativa de la Reserva de San Rafael con potencial biotecnológico. Metodología: El aislamiento in vitro se llevó a cabo con agar Papa Dextrosa (PDA) utilizando pequeñas porciones internas del basidiocarpo, la incubación se realizó a 28°C durante 4-7 días. El cultivo axénico fue conservado en la Colección de Cultivos de hongos de la Facultad de Ciencias y Tecnología de la Universidad Nacional de Itapúa, codificada como B9. La identificación taxonómica se realizó macro y microscópicamente teniendo en cuentas las claves taxonómicas descritas por otros autores. En cuanto a la identificación molecular, se procedió a la extracción del ADN genómico del micelio utilizando el protocolo estandarizado para hongos. La verificación de la calidad del ADN fue llevada a cabo mediante electroforesis en gel de agarosa (1% p/v). La región amplificada del ADN fue internal transcribed spacer (ITS) utilizando como cebadores ITS1 (5'-TCCgTAggTgAACCTgCgg-3') e ITS4 (5'-TCCTCCgCTTATTgATATgC-3'). Las secuencias de ADN fueron enviadas a Macrogen Inc. Company (South Korea) para su secuenciación. Resultados: En el análisis bioinformático, las secuencias obtenidas con los cebadores ITS fueron comparadas con el conjunto de datos moleculares usando Basic Local Alignment Search Tool (BLAST) del National Center for Biotechnology Information (NCBI) y la base de datos Fungal Barcoding. Se logró verificar que la cepa fúngica corresponde con un alto porcentaje de identidad mayor a 99% a Panus strigellus en ambas bases de datos. Conclusión: En conclusión, se logró aislar, identificar y conservar un hongo nativo de pudrición blanca, de interés biotecnológico, en el Departamento de Itapúa de Paraguay específicamente en la Reserva de San Rafael. La identificación molecular establece que corresponde a Panus strigellus, cuyas secuencias coincidieron en 99% en comparación con ambos bancos de genes.