INVESTIGADORES
CASTRILLO Maria lorena
congresos y reuniones científicas
Título:
SELECCIÓN DE AISLAMIENTOS DE TRICHODERMA NATIVOS DE MISIONES EN BASE A SU CAPACIDAD ENZIMÁTICA SECRETORA DE CELULASAS.
Autor/es:
CASTRILLO, ML; AMERIO, NS; BICH, GA; ZAPATA, PD; VILLALBA, LL
Lugar:
Posadas
Reunión:
Jornada; IX Jornadas Científico Tecnológicas de la Facultad de Ciencias Exactas, Químicas y Naturales de la Universidad Nacional de Misiones.; 2015
Resumen:
La producción de biocombustibles a partir de biomasa vegetal se ha incentivado en los últimos años debido a la necesidad de satisfacer requerimientos energéticos a partir de fuentes renovables. La degradación de biomasa lignocelulósica en azúcares monoméricos, mediante la acción de enzimas celulasas, es de gran importancia, debido a que es la etapa más lenta y costosa del proceso de obtención de biocombustibles de 2da generación, y se convierte en la principal dificultad económica que obstaculiza el aprovechamiento rentable de esta abundante fuente de energía. El género Trichoderma, debido a su distribución cosmopolita y su plasticidad ecológica, es considerado uno de los mejores secretores de celulasas. Teniendo en cuenta que el aislamiento y caracterización de nuevas aislados fúngicos capaces de secretar celulasas con rendimiento óptimo podría aportar soluciones innovadoras para esta etapa, nos propusimos como objetivo de trabajo evaluar cualitativa y cuantitativamente la capacidad de secretar celulasas en aislamientos de Trichoderma nativos de Misiones, con el fin de seleccionar aquellos más promisorios.A partir de 28 aislamientos de Trichoderma, nativos de Misiones, identificados morfológicamente a nivel de género, se evaluó la capacidad enzimática secretora de celulasas, mediante ensayos cualitativos en placas de Petri conteniendo medio sólido compuesto por Mandels, agar 1,7 % (p/v) y carboximetilcelulosa (CMC) 0,5 % (p/v), como única fuente de carbono. Fue posible categorizar los aislamientos de Trichoderma autóctonos en relación a su potencial celulolítico, clasificando los mismos mediante una escala de valores. Se destacaron los aislamientos PROF5, NAN13, TEYU14, POS3 y POS7 (++++), seguidos de PROF1, PROF4, PROF6, PROF8, POS6, POS11 y TRICHO4 (+++), y de POS8, POS10 y NAN11 (++), clasificados como positivos en relación a la secreción enzimática y potencialmente utilizables en diversas estrategias biotecnológicas que tengan como objetivo la utilización de grandes proporciones de celulasas. A partir de los aislamientos seleccionados cualitativamente, se procedió a la evaluación cuantitativa de cada una de las enzimas implicadas en el complejo celulasas: endo-1,4-β-glucanasas (EGs), celobiohidrolasas (CBHs), y β-glicosidasas (BGLs). Se incubaron durante 5 días a 29±1ºC con luz continua en medio líquido con Mandels y CMC 0,5% (p/v) ajustado a pH 4,8 mediante la incorporación del buffer succinato de sodio 100 mM. El efecto sinérgico de las tres enzimas del complejo se determinó con el método del papel de filtro. La actividad EGs y CBHs se determinó mediante el método del ácido DNS utilizando CMC o celulosa cristalina como sustrato, respectivamente. La actividad BGLs se determinó usando el método del p-nitrofenil-β-glucosido. Como resultado de lo expuesto se logró seleccionar los tres aislamientos más promisorios, codificados como: POS7, NAN13 y TEYU14.