OBTENCIÓN DE FRAGMENTOS GÉNICOS DE CELOBIOHIDROLASAS EN CEPAS DE TRICHODERMA SP AISLADOS EN MISIONES

CASTRILLO, ML; AMERIO, NS; FONSECA, MI; RODRIGUEZ, MD; SIOLI, GA; VILLALBA, LL; ZAPATA, PD

Rosario, Santa Fe

Congreso; XV Congreso Latinoamericano de Genética; XLI Congreso Argentino de Genética; XLV Congreso de la Sociedad de Genética de Chile; II Reunión Regional SAG-LITORAL; 2012

La bioconversión de celulosa a etanol a través de lasenzimas celulasas ha surgido como una alternativapotencial para reducir el uso de combustiblesfósiles y la polución ambiental, pero el alto costo deproducción ha obstaculizado su aplicación industrial.Un posible camino es profundizar los conocimientossobre las características bioquímicas y molecularesde los sistemas enzimáticos de microorganismosproductores de celulasas para favorecer el empleode diferentes estrategias biotecnológicas comosobreexpresión del gen, clonado, expresiónheteróloga, etc. En este sentido los hongos delgénero Trichoderma secretan un conjunto deenzimas celulasas que actúan sinérgicamente parahidrolizar la celulosa. Dentro de tales enzimas, lascelobiohidrolasas (CBH) son las más abundantes delconjunto. Nuestro objetivo fue obtener un fragmentogénico de la enzima celobiohidrolasa I mediantecebadores degenerados a partir de Trichodermasp. Se diseñaron cebadores degenerados sobreregiones conservadas en base a secuencias proteicasy conocidas de CBHI en ascomicetes. Luego dela amplificación los fragmentos génicos fueronpurificados y secuenciados. La secuencia obtenidaen Trichoderma sp. arrojó una identidad máximadel 95% con el gen de celobiohidrolasa (cbh1) deTrichoderma harzianum, por tanto nuestro fragmentopudo reconocerse como un nuevo miembro de lascelobiohidrolasas.