AISLAMIENTO E IDENTIFICACION DE UNA CEPA DEL HONGO ENTOMOPATOGENO BEAUVERIA NATIVA DE MISIONES

BICH, GA; CASTRILLO, ML; ZINI, PL; KRAMER, FL; VILLALBA, LL; ZAPATA, PD

Bariloche

Congreso; XLIII CONGRESO ARGENTINO DE GENÉTICA IV REUNION REGIONAL SAG-LA PAMPA PATAGONIA; 2014

La  utilización  de  caracteres  morfológicos  para  la identificación  de  cepas  fúngicas  es  una  herramienta sumamente    importante    pero,    para    llegar    a    una identificación de especies de manera certera y completa, son complementados mediante la utilización de herramientas moleculares. El objetivo del presente trabajo fue aislar e identificar  morfológica  y  molecularmente  una  cepa  del hongo  entomopatógeno  Beauveria  nativa  de  Misiones. A  partir  de  muestras  de  suelos,  se  realizaron  diluciones seriadas y se sembraron en placas de Petri conteniendo agar papa dextrosa como medio de cultivo. Fueron incubadas a  28°  C  por  7  días.  Luego  se  realizó  la  caracterización morfológica  de  las  mismas.  Una  vez  identificada  a  nivel de género y especie, se procedió al aislamiento de ácidos nucleicos  para  su  corroboración  molecular. A  partir  del material genético extraído, se logró amplificar y secuenciar la  región  ITS1-5,8S-ITS2  mediante  la  utilización  de cebadores universales ITS 1 e ITS 4. Una vez obtenida la región de interés, se contrastó la información obtenida con la existente en las bases de datos, mediante la herramienta Blast (Basic Local Alignment Search Tool) del NCBI (National Center  for  Biotechnology  Information)  y  la  herramienta Pairwise sequence alignment del Fungal barcoding disponibles on  line.  Se  seleccionaron  aquellas  secuencias  con  mayor porcentaje de similitud, y se analizaron filogenéticamente tanto por el programa Geneius 3.6.1, como por Mega 5.1. Fue posible corroborar, por métodos moleculares, que la cepa aislada e identificada morfológicamente correspondía a Beauveria bassiana.