AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE CEPAS FUNGICAS DE LOS GÉNEROS ASPERGILLUS Y PENICILLIUM CON POTENCIAL CELULOLITICO NATIVAS DE LA PROVINCIA DE MISIONES.

ZINI, PL; CASTRILLO, ML; BICH, GA; MARTINEZ, CN; FONSECA, MI; ZAPATA, PD; VILLALBA, LL

Buenos Aires

Congreso; XIII Congreso Argentino de Micología - XXIII Jornadas Argentinas de Micología - 1ra Reunión de la Asociación Micológica Carlos Spegazzini; 2014

La  naturaleza  agotable  de  las  reservas  de  combustibles  fósiles  y  el  cambio  climático  suscitan preocupaciones sobre la seguridad energética, lo cual genera interés en la utilización de energías renovables.  La  conversión  de  biomasa  celulósica  en  etanol  representa  una  alternativa  para  la generación sustentable de energía. Sin embargo, para maximizar el rendimiento de este proceso se  debe  profundizar  en  los  aspectos  relacionados  con  la  degradación  de  celulosa  en  azúcares fermentables, lo cual contribuye a disminuir costos y hacer el proceso económicamente rentable. El presente trabajo tuvo como objetivo aislar e identificar morfológica y molecularmente cepas de Aspergillus y Penicillium con capacidad de secretar enzimas celulolíticas. Para ello se aislaron e identificaron a nivel de género 20 cepas del género Aspergillus y 24 cepas del  género  Penicillium  de  una  amplia  y  diversa  variedad  de  sustratos  regionales,  como  ser carambola, maracuyá, guayaba, mamón, naranja, lima, limón, pomelo, yerba mate, té, maní, palta, zapallo,  entre  otros.  Por  medio  del  ensayo  con  el  revelador  rojo  Congo  se  determinó cualitativamente la capacidad celulolítica de las cepas aisladas, y finalmente fueron confirmadas por métodos moleculares y bioinformaticos. Fue  posible  seleccionar  11  cepas  del  género  Aspergillus  y  14  cepas  del  género  Penicillium  con capacidad celulolitica. Para  la  confirmación  molecular,  se  tomaron  dos  secuencias  de  buena  calidad,  a  partir  de  las cuales se construyo un cóntigo consenso mediante el programa Geneious 3.6.1, generándose una secuencia de 521 pb para la cepa Asper 7 y una secuencia de 488 pb correspondiente a la cepa Peni 23. Por medio de las herramientas de búsqueda de identidad y similitud BLASTn de la base de datos del NCBI, y la herramienta Pairwise Sequence Alignment de la base de datos secundaria ?curada? Fungal  barcoding,  se  seleccionaron  75-150  secuencias,  que  junto  a  los  cóntigo  consensos  de nuestras cepas, fueron alineadas por medio del algoritmo Muscle del paquete MEGA 5.1.  Los resultados de los alineamientos obtenidos, arrojaron para la cepa Asper 7 índices de identidad máxima del 99.626% con la cepa A. carbonarius (DTO 241- D2), y para la cepa Peni 23 índices de identidad máxima de 100% con la cepa P. chrysogenum (DTO 147-E8).  Luego,  se  llevo  a  cabo  la  construcción  de  arboles  filogenéticos  por  los  métodos  Máximum Parsimony (MP), Máximum Likelihood (ML), y Neighbour joining (NJ). Constatando lo observado con anterioridad, Peni 23 se localizó y agrupó en el clado de la sección Chrysogena, y Asper 7en el clado de la sección Carbonarius.  Con lo cual, fue posible identificar y clasificar a la cepa Asper 7 como A. carbonarius (A7) y a la cepa Peni 23 como P. chrysogenum (P23) por medio de la amplificación de una región génica, su contrastación con las secuencias existentes en las bases de datos, y la construcción de árboles filogenéticos por los métodos MP, ML y NJ.