INFLUENCIA DE DIFERENTES FUENTES DE NITRÓGENO EN LA SECRECIÓN DE CELULASAS EN CULTIVO SOLIDO EN CEPAS DE TRICHODERMA NATIVAS DE MISIONES.

CASTRILLO, ML; BARENGO, MP; RODRIGUEZ, MD; ZAPATA, PD; VILLALBA, LL

Buenos Aires

Congreso; XIII Congreso Argentino de Micología - XXIII Jornadas Argentinas de Micología - 1ra Reunión de la Asociación Micológica Carlos Spegazzini; 2014

La población mundial crece a pasos agigantados, el uso indiscriminado de combustibles fósiles no renovables produce gases muy contaminantes para el ecosistema, es por ello que en la actualidad se  encuentra  en  auge  la  producción  de  biocombustibles  a  partir  de  sustratoslignocelulósicos capaces  de  ser  aprovechados  utilizando  complejos  enzimáticos  que hidrolizan  la  celulosa  en monosacáridos de glucosa. Estos complejos se componen de tres grupos de enzimas: endo-1,4 β-glucanasas,  exoglucanasas  y  β-glucosidasas.  Los  hongos  del  género  Trichoderma  poseen distribución cosmopolita y amplia plasticidad ecológica, siendo capaces de hidrolizar la celulosa de residuos agroindustriales a glucosa para su posterior conversión por fermentación a bioetanol. Por tanto,  las  fuentes  de  carbono  y  nitrógeno  utilizadas  pueden  influir  de  manera  significativa  en  la secreción enzimática. Una de las fuentes de nitrógeno orgánica más utilizada es el medio Mandels como complejo nitrogenado completo.  El objetivo de este trabajo fue evaluar la influencia de fuentes de nitrógeno orgánicas para inducir una  mayor  secreción  de  celulasas mediante  cultivo  sólido  en  cepas  de  Trichoderma  nativas  de Misiones. Se trabajó con dos cepas de Trichoderma  seleccionadas por nuestro grupo de trabajo (NAN  13  y  TEYU  14).  Para  cada  cepa,  se  realizaron  diferentes  ensayos,  en  sustrato  sólido conteniendo  cascarilla  de  arroz  como  fuente  de  carbono  y  diferentes  fuentes  nitrogenadas orgánicas  (urea,  extracto  de  levadura,  sulfato  de  amonio  y  complejo  nitrogenado  Mandels) seleccionadas por bibliografía. Se inoculó cada ensayo con 1x107 esporas/mL, y se incubaron a 28°C  ±1  con  luz  continua  por  5  días.  Cada  24  hs.  se  tomaron  alícuotas  para  determinación enzimática.  Las  actividades  endo-1,4  β-glucanasas  y    β-exoglucanasas  se  determinaron  por  el método del ácido 3,5-dinitrosalicílico, la actividad β-glucosidasa por el ensayo del p-nitrofenil-β-D-glucopiranósido y la actividad sinérgica del complejo con el ensayo de Papel de Filtro. Los análisis de varianza fueron evaluados con el programa GraphPad Prisma 6.0. Los ensayos realizados para ambas  cepas  de  Trichoderma  demostraron  que  la  fuente  de  nitrógeno  que  presentó  mayor actividad enzimática celulolítica fue el complejo nitrogenado Mandels. Por tanto, se podría inferir que el incremento en la secreción de celulasas se da mediante la combinación de las diferentes fuentes  de  nitrógeno  ensayadas,  y  no  por  cada  una  por  separado;  ya  que  dicho complejo  está compuesto principalmente por urea, extracto de levadura y sulfato de amonio.