IDENTIFICACIÓN MOLECULAR DE UNA CEPA DE FÚNGICA ENTOMOPATÓGENA DEL GÉNERO BEAUVERIA NATIVA DE MISIONES ARGENTINA

SILVA, MRV; BICH, GA; CASTRILLO, ML; FONSECA, MI; ZAPATA, PD; VILLALBA, LL

Simposio; V Simposio Chileno de Control Biológico; 2022

Actualmente, se conoce que los hongos entomopatógenos del género Beauveria (Orden: Hypocreales) son cosmopolitas y causan infecciones naturales a una gran diversidad de insectos. Su aislamiento, multiplicación y ensayos de patogenicidad en el laboratorio determinarían su potencial utilización en el control biológico de insectos plaga. La taxonomía clásica de dichos hongos se basa en la morfología de sus estructuras reproductivas, pero dichos caracteres no son conclusivos para determinar la especie. Es por ello que las técnicas de biología molecular se utilizan para complementar no sólo su identificación, sino también la caracterización y filogenia de especies a partir de secuencias génicas específicas (marcadores moleculares). Por lo tanto, nos propusimos como objetivo del trabajo identificar molecularmente utilizando dos marcadores al aislamiento Beauveria HEP MSO2 nativo de Misiones con potencial utilización para el control de plagas. Para ello, se reactivó el aislamiento en medio sólido agar papa dextrosa (PDA 39 g/L) incubándose de 7 a 10 días en oscuridad a 28 ºC. Posteriormente se cortaron asépticamente discos con micelio del borde de las colonias, y se colocaron en tubos cónicos de 50 mL conteniendo medio líquido YES (15g/L de extracto de levadura y 30 g/L de sacarosa). Se incubaron en iguales condiciones. Siguiendo el protocolo de Fonseca et al., (2015) se extrajo ADN genómico de micelio desarrollado. Los espaciadores transcritos internos (ITS1-5.8S-ITS2) y el factor de elongación 1 α (TEF 1α), se amplificaron por PCR y se enviaron a secuenciar a Macrogen, Corea. Se evaluó la calidad de las secuencias obtenidas (cromatogramas) con el programa CHROMAS . Las mismas se analizaron y se generaron secuencias consenso utilizando el programa Geneious 9.1.5 (Kearse et al., 2012) y se compararon con las secuencias alojadas en la base de datos del National Center for Biotechnology Information (NCBI). A partir de la identificación molecular con ambos marcadores moleculares se determinó que el aislamiento Beauveria HEP MSO2 presentó índices de similitud e identidad elevados (>90%) con diferentes cepas de Beauveria bassiana.