EVALUACIÓN DE LA CONSERVACIÓN DE VIABILIDAD DE CEPAS NATIVAS DE METARHIZIUM

BICH, GA; CASTRILLO, ML; KRAMER, FL; ZAPATA, PD; VILLALBA, LL

Posadas

Jornada; 1ras Jornadas Institucionales del InBioMis. 10 años Construyendo Biotecnología; 2022

Los hongos entomopatógenos son un grupo de microorganismos que tienen laparticularidad de parasitar a diferentes grupos de insectos y otros artrópodos, comolas arañas y los ácaros. La caracterización de los hongos, tanto a nivel morfológico,fisiológico y molecular, es considerada una etapa esencial para la selección deespecies fúngicas biocontroladoras promisorias. Una de las características deimportancia al momento de seleccionar un agente biocontrolador es evaluar sucapacidad de conservación en un cepario para futuras pruebas y procesos deproducción. En la evaluación de condiciones de conservación adecuadas para cepasfúngicas promisiorias se utilizaron dos cepas nativas de hongos entomopatógenos(HEP) pertenecientes al género Metarhizium aisladas de muestras de suelo einsectos colectados en campañas de bioprospección. Estas cepas fueroncodificadas como HEP2 y HEP14. Se evaluaron tres condiciones de cultivo,dispuestos en tubos plásticos de 1,5 mL, para cada una de las cepas fúngicas:medio de cultivo papa dextrosa agar 3,9%; granos de arroz estéril; y agua destiladaestéril. Las cepas fueron inoculadas en cada uno de los tubos de los tratamientoscolocando un disco de la colonia fúngica, e incubándose a 28 ± 1°C durante 7 a 10días. Este procedimiento se realizó por triplicado para cada cepa. Estos tubos fueronconservados a 4°C hasta el momento de su evaluación. Transcurrido el periodo de12 y 24 meses, se determinó la viabilidad y pureza de cada una de las cepasfúngicas en placas de Petri de 60 mm de diámetro con medio de cultivo PDA. Laviabilidad se evaluó en el microscopio óptico como el número de conidiasgerminadas en el número total de conidias contabilizadas; la pureza fue evaluadacomo la presencia de contaminación microbiana. El análisis de varianza (ANOVA) serealizó mediante el programa Statgraphics Centurion XV, el cual también fueutilizado para aplicar el método de diferencia mínima significativa (LSD) de Fisher,con un nivel de 95% de confianza. En base a las condiciones de experimentaciónevaluadas, se observó que ambas cepas fúngicas de Metarhizium conservadas entubos con PDA y en agua destilada estéril presentaron un porcentaje de viabilidadmedia de las conidias cercanas al 80% a los 12 meses de almacenamiento y de 70%a los 24 meses de almacenamiento. En líneas generales, la conservación de lascepas fúngicas de Metarhizium en tubos con PDA o agua destilada estéril no presentó diferencias estadísticamente significativas para periodos de tiempo dealmacenamiento similares. Sin embargo, se evidenciaron diferenciasestadísticamente significativas cuando estas cepas fúngicas fueron almacenadasen granos de arroz estéril. Asimismo, en ninguno de los métodos de conservaciónempleados se observó la contaminación de los tubos con ácaros, que es uno de losagentes contaminantes recurrentes en cultivos fúngicos. Además, las cepasfúngicas evaluadas no presentaron contaminaciones con otros hongos por lo cuallas técnicas evaluadas fueron adecuadas en relación a su pureza.