INVESTIGADORES
CARRILLO carolina
congresos y reuniones científicas
Título:
Caracterización funcional y bioquímica del transporte de riboflavina en tripanosomátidos
Autor/es:
BALCAZAR DE; BONOMI HR; CARRILLO C
Lugar:
Santa Fe
Reunión:
Congreso; XXVIII Reunión Anual, Sociedad Argentina de Protozoología SAP; 2016
Institución organizadora:
SAP
Resumen:
La Enfermedad de Chagas es una endemia americana, causada por el protozoo Trypanosoma cruzi. Los tratamientos actuales presentan eficacia limitada, alta toxicidad y pueden generar resistencia por lo que resulta necesario desarrollar nuevas terapias que apunten a blancos esenciales y específicos del parásito.La riboflavina (Rf) es una vitamina esencial para toda célula, por ser precursora de los cofactores FMN y FAD, responsables de una gran variedad de reacciones celulares. Se ha descripto que los tripanosomátidos son auxótrofos para Rf. Nuestros ensayos previos indicaron que la Rf estimula la proliferación de epimastigotes y amastigotes de T. cruzi, y también la metaciclogénesis, mientras que análogos de Rf interfirieron con estos procesos. También identificamos a un potencial transportador de Rf (TcRibJ), identificado por análisis in silico, perteneciente a la superfamilia MFS. El objetivo de este trabajo fue caracterizar el transporte de Rf en epimastigotes de T. cruzi y especies relacionadas. Nuestros estudios muestran que los epimastigotes de T. cruzi, procíclicos de T. brucei, promastigotes de L. mexicana y de Phytomonas Jma y coanomastigotes de C. fasciculata fueron capaces de incorporar 3H-Rf, de manera tiempo- y concentración- dependiente. Para todos los casos, el transporte mostró afinidades similares entre sí, en el orden sub-micromolar (Km: 0,07 ? 0,39 µM). En estudios en epimastigotes de T. cruzi, se vio que FMN o FAD también son incorporados y que los análogos de Rf afectaron la incorporación de 3H-Rf. La expresión heteróloga de TcRibJ en bacterias E. coli auxótrofas para Rf recuperó la capacidad proliferativa de dichos cultivos en medios con baja disponibilidad de Rf, FMN o FAD. Por otra parte, la sobre-expresión de TcRibJ en epimastigotes mostró un incremento significativo en la velocidad de incorporación de Rf, corroborando su función como transportador de Rf en T. cruzi.Mediante estudios bioinformáticos se identificaron potenciales transportadores RibJ en diversos tripanosomátidos. Nuestros análisis filogenéticos determinaron que RibJ es exclusivo de este grupo taxonómico, observándose un origen común y una diversificación a lo largo de los distintos géneros.Estos resultados muestran avances en la caracterización del transporte de Rf en tripanosomátidos, particularmente en T. cruzi; y junto con análisis previos, señalan a Rf y su transporte como potencial blanco para el desarrollo de terapias nuevas/complementarias.