IDENTIFICACIÓN DE microRNAs EN Taenia crassiceps UTILIZANDO UNA ESTRATEGIA DE ALTO RENDIMIENTO

PÉREZ MG; CUCHER M; MACCHIAROLI, N.; AVILA HG; ANCAROLA E; VACA H; KAMENETZKY L; ROSENZVIT M C

Otro; XXVII Reunión Anual Sociedad Argentina de Protozoología; 2015

IDENTIFICACION DE microRNAs EN Taenia crassiceps UTILIZANDO UNA ESTRATEGIA DE ALTO RENDIMIENTO. Pérez Matías Gastón1, Cucher Marcela1, Macchiaroli Natalia1, Avila Gabriel 1, Eugenia Ancarola1, Vaca Hugo1 , Kamenetzky Laura1, Rosenzvit Mara Cecilia1. 1IMPaM-UBA-CONICET, Buenos Aires, Argentina.E-mail: mgperez@fmed.uba.arTaenia crassiceps es un parásito cestode cuyo ciclo biológico involucra a carnívoros como hospedadores definitivos. Roedores y conejos son los principales hospedadores intermediarios; aunque otras especies como los humanos pueden comportarse como hospedadores accidentales. Este platelminto es el modelo experimental de Taenia solium ya que comparten una gran similitud morfológica y antigénica. Los microRNAs (miRNAs) son RNAs pequeños, no codificantes, reguladores maestros de la expresión génica que poseen un rol fundamental en el desarrollo, crecimiento parasitario y en la respuesta a condiciones de stress.El objetivo de este trabajo es identificar por primera vez miRNAs en cisticercos de Taenia crassiceps, tratados con praziquantel (PZQ) a dosis subletales y no tratados, mediante secuenciación de alto rendimiento. Para realizar los experimentos se partió de tres réplicas biológicas y tres réplicas técnicas. Se realizaron ensayos para determinar la dosis subletal de PZQ con la que se trataron los cisticercos. Se extrajo ARN de tamaño menor a 200 bases, se realizó la transcripción reversa y por medio de PCR punto final se analizó la expresión de los miRNAs mir-71 y Bantam en cisticercos tratados con PZQ y sin tratar. El repertorio completo de miRNAs está siendo obtenido por smallRNA-seq. En este trabajo se realizó por primera vez la identificación de miRNAs de T.crassiceps con primers de Echinoccocus granulosus, comprobando la presencia de miRNAs conservados entre estas dos especies de cestodes. La futura comparación del repertorio completo de RNAs pequeños in silico, con los repertorios de miRNAs de E. granulosus, Echinococcus multilocularis y Mesocestoides corti, sumado al estudio de su rol biológico, permitirá evaluar el potencial de estas moléculas como futuros blancos quimioterapéuticos de enfermedades zoonóticas producidas por cestodes, como la hidatidosis y neurocisticercosis.