Caracterización histológica, inmunohistoquímica y citogenética de un linfoma difuso canino de células B

CALIRI MARTINA; PEDROSA ANALÍA; GORLA NORA

Jornada; Jornadas Internacionales de Veterinaria; 2022

El linfoma canino abarca un grupo heterogéneo de enfermedades que se originan como consecuencia de la transformación de células linfocitarias. La clasificación actual se cimenta en la propuesta para el linfoma humano por la Clasificación Europea Americana de Neoplasias Linfoideas y la Organización Mundial de la Salud (REAL-WHO) y comprende más de 20 subtipos de tumores linfoides, cada uno de los cuales representa una entidad bien caracterizada (Valli et al., 2011, 2013). La identificación de cada subtipo se basa en las características clínicas de la enfermedad y en las propiedades del tejido neoplásico: el patrón de crecimiento, tamaño del núcleo, la morfología nuclear, el número de mitosis por campo (400x) y el inmunofenotipo. Además, las alteraciones citogenéticas que contribuyen a la inestabilidad genómica y por ende a la transformación maligna de las células, son características de determinados fenotipos celulares, como por ejemplo las ganancias en el cromosoma 13 (CFA 13) en linfomas de células B (Thomas, et al. 2003).La gran variabilidad entre los diferentes tipos de linfoma puede evidenciarse por la forma en la respuesta al tratamiento y la supervivencia del animal. El linfoma difuso de células Bgrandes (DLBCL), es el subtipo más común en caninos al igual que en humanos,representa el 60-70% en el total de los casos de la especie. El objetivo de este trabajo fuedescribir un caso de linfoma canino en base a la clasificación de la REAL-WHO y describirlas características citogenéticas. MATERIALES Y MÉTODOS Canino hembra, mestizo, 10 años de edad, con linfoadenomegalia generalizada de unmes previo a la consulta. El diagnóstico inicial de linfoma se obtuvo mediante citología porPAAF (punción aspiración con aguja fina).Previo al comienzo del tratamiento quimioterápico se obtuvo muestra de sangre periféricacon heparina. Se llevó a cabo la técnica de citogenética convencional por un lado delinfocitos de sangre periférica y por otro de tejido de linfonódulo, en la que se cultivaron enmedio rpmi 1640 a 37°C y posterior bandeo GTG. Se analizaron 20 metafases conrecuento cromosómico y se armó el cariotipo de cuatro de ellas. Luego de dos meses decomenzado el tratamiento, debido al desmejoramiento de la paciente se decide laeutanasia. Post-mortem se obtiene muestra de linfonódulo poplíteo en formol 4% sobre elque se realiza la técnica histológica estándar para estudios de histopatología einmunohistoquímica. Los criterios histopatológicos que se evaluaron fueron: cápsula,corteza y médula del linfonódulo, características de los linfocitos, núcleo (tamaño y forma,cantidad y ubicación de nucléolos), citoplasma, presencia de macrófagos y célulasplasmáticas. Los anticuerpos usados para obtener el inmunofenotipo son los anticuerposanti-CD20 y anti-CD3.RESULTADOSEn el análisis citológico se observó un proceso linfoproliferativo, con poblaciónheterogénea de linfocitos de tamaño intermedio a grande, con diagnóstico presuntivo delinfoma. Este resultado fue confirmado mediante histopatología en el que se observóengrosamiento e infiltración de la cápsula del ganglio. Tanto en corteza como en médulase observa un patrón difuso de distribución de linfocitos neoplásicos, con característicascelulares particulares: predominio de células grandes (núcleos >2 el tamaño de un glóbulorojo) redondeados e irregulares; la mayoría de las células presentaron un predominio demúltiples nucléolos situados en la periferia nuclear. Citoplasma abundante. Índice mitóticobajo=0-5 mitosis por campo. Contornos celulares irregulares. Escasa presencia demacrófagos y células plasmáticas. La lectura inmunohistoquímica fue positiva para elmarcador de membrana CD20 de células B. El diagnóstico histopatológico einmunofenotípico fue indicativo de DLBCL centroblástico. En cuanto al análisiscitogenético, el número modal de las metafases analizadas fue 78, XX, excepto en 3 deellas que tenían un número cromosómico 79, XX. Se observaron 4 roturas de cromátida yun gap de cromátida en los cariotipos analizados.DISCUSIÓNEl DLBCL representa el subtipo más común tanto en caninos como en humanos (Seelig,et al. 2016). En la mayoría de los casos el hallazgo clínico más frecuente es elagrandamiento de los linfonódulos. Existe una gran variabilidad dentro del los DLBCL encuanto a la morfología histológica y el índice mitótico que tiene una alta correlación con lasupervivencia del animal, con un número de mitosis por campo bajo se reporta una mediade supervivencia de alrededor de 180 días (Aresu, 2016), en este caso fue de 120 días.Las alteraciones citogenéticas aleatorias, contribuyen a la inestabilidad genómica. Laidentificación del cromosoma extra no fue posible por citogenética convencional. Lascaracterísticas citogenéticas son útiles como predictores pronósticos y en combinacióncon citogenética molecular permiten implementar terapias dirigidas. El linfoma canino noes una enfermedad única en sí misma, sino que comprende una entidad con una granvariedad de presentaciones neoplásicas con características morfológicas, comportamientobiológico, inmunofenotípicas y genéticas diversas. La evaluación propuesta por la REALWHO, abre el panorama al establecimiento de diagnósticos más certeros y a la posibilidadde tratamientos más específicos.CONCLUSIONESEl canino en estudio tuvo un diagnóstico preciso de DLBCL centroblástico. La clasificaciónacorde a la REAL-WHO fue posible en base a las características clínicas, histológicas einmunofenotípicas.