Evaluación de cultivo celular en chips de microfluídica para su aplicación en la producción de anticuerpos monoclonales

A. PEÑAHERRERA ; C. PAYÉS ; M. SIERRA-RODERO ; G. ROSERO ; C. LASORSA ; N. BOURGUIGNON ; P. GRANELL ; F. GOLMAR ; B. LERNER ; G. HELGUERA ; M.S. PÉREZ

BUENOS AIRES

Conferencia; Nano2016; 2016

Los dispositivos de microfluídica aplicados al cultivo celular permiten crecer células bajo condiciones controladas apropiadas para la producción de proteínasrecombinantes. Con el objetivo de optimizar el cultivo de células capaces de expresar proteínas recombinantes en los microdispositivos, se cultivaron células HEK-293T en dispositivos de polimetilmetacrilato (PMMA) y polidimetilsiloxano (PDMS) en presencia o ausencia del agente de adhesión celular poli-D-lisina. Se evaluaron diferentes geometrías y espesores así como también la influencia del flujo sobre el crecimiento y la adhesión celular. Los resultados muestran que la presencia de poli-D-lisina mejora la adhesión y viabilidad de las células tanto en flujo continuo como discontinuo. Adicionalmente, se observó una mejor Adhesión celular en las esquinas de los microcanales, así como también en los canales anchos y las cisternas, posiblemente debido a la disminución del estrés hidrodinámico en estas áreas. Como modelo se estudió la distribución de células infectadas con pseudovirus del virus VSV (VSV por sus siglas en inglés ?vesicular stomatitis virus?) a través de la expresión de la proteína fluorescente verde GFP (GFP por sus siglas en inglés ?green fluorescent protein?). Los resultados obtenidos proveen información para lograr un diseño óptimo de la arquitectura de los microcanales para cultivos de células adherentes a largo plazo. Además, sugieren la factibilidad de utilizar los microdispositivos como bioreactores para la producción de anticuerpos monoclonales terapéuticos y la evaluación de actividad biológica in vitro de fármacos.