Inhibidor de proteasas tipo Kunitz de Fasciola hepatica: rol supresor en la activación iniciada por ligandos Toll en células dendríticas murinas

FALCÓN CRISTIAN; CARRANZA FRANCO; CERVI LAURA

Mar del Plata

Congreso; LVII Reunión Cientifica Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2009

Sociedad Argentina de Inmunología

La interacción de un patógeno con células dendríticas (CD) determina el estado de madurez de estas células, evento clave para definir el perfil de respuesta adaptativa. Los antígenos de helmintos en general, no producen maduración clásica en CD y modulan la activación de estas células por ligandos de TLR. Resultados previos mostraron que antígenos de un extracto total (TE) de Fasciola hepatica inhiben las señales de activación inducidas por LPS en CD murinas. El objetivo de este trabajo fue identificar el componente del parásito F. hepatica capaz de inhibir las señales de activación de CD iniciada por ligandos de TLR. Se realizó un fraccionamiento de TE, obtenido a partir de gusanos adultos de hígados bovinos infectados, por cromatografía de tipo FPLC. De las diferentes fracciones obtenidas, una de bajo PM (FVII), presentó actividad inhibitoria de la producción de TNF por CD de médula ósea de ratones BALB/c estimuladas con LPS (p< 0.05). Por el contrario una fracción de alto PM (FI) estimuló por si misma la producción de TNF. CD tratadas con la FVII y FI presentaron niveles de TNF mas bajos que las CD estimuladas solo con FI. El análisis de FVII por electroforesis SDS-PAGE mostró la presencia de dos bandas de 6,5 y 13 kDa, las cuales revelaron un 90% de homología con un inhibidor tipo kunitz de F. hepatica, lo que representaría monómero y dímero de la misma proteína. Demostramos también que la vía JAK-STAT3 estaría involucrada en la inhibición de la producción de IL-12p70 por antígenos del parásito, ya que el uso de un inhibidor de esta vía (AG490), revirtió parcialmente la supresión ejercida por TE sobre la activación de las CD por LPS, incrementando los niveles de IL-12p70 (p<0.05). Los resultados muestran que un inhibidor de proteasas tipo kunitz encontrado en Fasciola hepatica, presenta propiedades inmunomoduladoras de la activación de CD por ligandos TLR, lo cual tendría una proyección como una molécula inmunosupresora  de respuestas inflamatorias.