Genotipificación RHD fetal en plasma materno

DI MÓNACO R; BIONDI C; GARCÍA BORRÁS S; RACCA A; COTORRUELO C

Rosario – Argentina

Congreso; XIX Congreso Latinoamericano de Obstetricia y Ginecología - FLASOG 2008; 2008

Federación Argentina de Sociedades de Ginecología y Obstetricia

Objetivos: desarrollar una estrategia de genotipificación RHD prenatal utilizando ADN obtenido de plasma materno. Pacientes: se estudiaron 17 muestras de sangre periférica de mujeres RhD negativas con embarazo único (rango de gestación 25 a 33 semanas), que concurrieron al Hospital Provincial del Centenario. Métodos: se obtuvo ADN de plasma materno por adsorción y elución en membranas de sílica gel. El genotipo RHD fetal fue determinado con estrategias de nested PCR en un único tubo, amplificando el intrón 4 y la región 3’ no codificante del gen RHD. Paralelamente se amplificó el gen SRY para confirmar el origen fetal del ADN obtenido. Posteriormente se determinó el fenotipo RhD en sangre de cordón de los recién nacidos. Resultados: se genotipificaron 12 fetos RHD positivos y 5 fetos RHD negativos. Se determinó la presencia del gen SRY en 6 fetos RHD positivos y en 3 fetos RHD negativos. En 2 de las muestras analizadas no se obtuvieron productos de amplificación en ninguna de las reacciones realizadas. Los resultados fueron coincidentes con el fenotipo RhD y el sexo del recién nacido. Conclusiones: la estrategia de nested PCR permite realizar la genotipificación RHD a partir de ADN obtenido del plasma de mujeres embarazadas. Cuando los estudios moleculares fueron negativos no se pudo confirmar la presencia de ADN fetal. La determinación RHD prenatal no invasiva evitaría, cuando el feto es RhD negativo, el uso de la profilaxis con IgG anti-D durante el embarazo.