Estimadores de la separacion de glóbulos rojos senescentes: volumen corpuscular medio y creatina

MUFARREGE N; RUCCI A; COTORRUELO C; GARCÍA BORRÁS S; RACCA L; BIONDI C; RACCA A

Rosario - Argentina

Congreso; X Congreso y XVIII Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Rosario; 2008

Sociedad de Biología de Rosario

El envejecimiento del Gl¨®bulo Rojo (GR) es un proceso continuo que no produce ning¨²n cambio cr¨ªtico que permita reconocer con precisi¨®n a los GR Senescentes (GRSe). Durante la senescencia eritrocitaria se produce una disminuci¨®n del Volumen Corpuscular Medio (VCM) que por algunos autores es considerado un marcador morfol¨®gico de este proceso. Debido a la depleci¨®n energ¨¦tica asociada a la edad del GR, la concentraci¨®n de creatina eritrocitaria podr¨ªa ser utilizada como un estimador del envejecimiento. El objetivo de este trabajo fue investigar estos par¨¢metros en poblaciones de GRSe y GR J¨®venes (GRJ) obtenidas por centrifugaci¨®n en gradiente de Percoll. Se procesaron muestras de sangre perif¨¦rica (n=13) de dadores voluntarios con serolog¨ªa negativa que concurrieron al servicio de Hemoterapia del Hospital Provincial del Centenario. La sangre anticoagulada con EDTA fue sometida a centrifugaci¨®n en gradientes preformados de Percoll. Se recuperaron las distintas fracciones con bomba perist¨¢ltica desde la parte superior del tubo. La primera fracci¨®n correspondi¨® a GRJ y la ¨²ltima a GRSe. Luego de tres lavados con soluci¨®n fisiol¨®gica, las distintas suspensiones se diluyeron para lograr un hematocrito del 40%. Se determin¨® el VCM en un contador SYSMEX SF-3000. La concentraci¨®n de creatina se determin¨® espectrofotom¨¦tricamente a partir de la reacci¨®n con diacetilo y ¦Á-naftol. En el an¨¢lisis estad¨ªstico se utiliz¨® la t de student para muestras dependientes. El valor promedio de VCM de los GRSe (89.2 ¡À 2.9 fL) fue significativamente menor (p<0.0001) al observado en GRJ (91.4 ¡À 3.3 fL). Los resultados de concentraci¨®n de creatina en GRSe (2.76 ¡À 0.76 ¦Ìg/mg Hb) fueron estad¨ªsticamente inferiores (p<0.0001) a los obtenidos en GRJ (4.15 ¡À 1.12 ¦Ìg/mg Hb). Los hallazgos similares observados en los par¨¢metros estudiados, indican que el VCM y la concentraci¨®n de creatina son igualmente eficientes para evaluar la separaci¨®n de poblaciones eritrocitarias de distintas edades. El m¨¦todo de elecci¨®n depender¨¢ del equipamiento del laboratorio. La determinaci¨®n del VCM es el par¨¢metro m¨¢s pr¨¢ctico si se dispone de un contador hematol¨®gico. Sin embargo, la determinaci¨®n de la concentraci¨®n de creatina eritrocitaria es igualmente confiable en la evaluaci¨®n de las distintas poblaciones etareas.