NKG2D regula positivamente la secreción de IFN por células NK humanas estimuladas con IL12 y agonistas de TLR3 y TLR7

GIRART, MARÍA VICTORIA; FUERTES, MERCEDES BEATRIZ; DOMAICA, CAROLINA INÉS; ROSSI, LUCAS EZEQUIEL; ZWIRNER, NORBERTO WALTER

Mar del Plata

Congreso; 54º Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2006

Sociedad Argentina de Inmunología

La citotoxicidad y secreción de IFNg por células NK está regulada por NKG2D y el reconocimiento de sus ligandos MICA/B y ULBPs1-3. MICA se expresa en tumores y células infectadas. Además, las cél NK expresan TLR2, 3, 7, 8 y 9. Previamente demostramos que agonistas de TLR3 (polyIC) y TLR7 (Loxoribine -loxo-) + IL12 o IL15 no modulan la expresión de NKG2D ni la citotoxicidad de las cél NK contra un clon del melanoma MEL-LES (no expresa MICA en superficie) transfectado con MICA (MICA+) vs un clon control (MICA-), pero que en presencia de IL12 promueven la producción de IFNg. Objetivo: estudiar las vías de señalización que regulan la producción de IFNg en cél NK estimuladas con IL12+polyIC o loxo y el papel de NKG2D en esta respuesta. Estimulamos cél NK humanas durante 24h con IL12+loxo o polyIC y observamos una disminución dosis-dependiente en el IFNg producido (por ELISA; [IFNg] en pg/ml) en presencia de U0126, SB202190, rapamicina y sulfasalazina -Sz- (todos con p<0,01) pero no con ciclosporina -CsA- (tabla). La producción de IFNg vía IL12+loxo o polyIC fue sensible a cloroquina: 1574±185 (loxo s/cloroq) vs 97±1 (loxo c/cloroq), p<0,01; 227±13 (polyIC s/cloroq) 89±1 (polyIC c/cloroq), p<0,01 y aumentó por cocultivo de cél NK con el clon MICA+ (loxo: 672±87; polyIC: 623±120) pero no con el clon MICA- (loxo: 386±8; polyIC: 285±29), con p<0,05 (para ambos estímulos). Conclusiones: La secreción de IFNg por cél NK estimuladas con agonistas de TLR3 o 7 + IL12 depende de la señalización en endosomas (como en cél dendríticas), lo que activa las vías de ERK, p38 MAPK, p70S6K y NFkB. Esta capacidad se potencia por estimulación de NKG2D, lo que resalta el papel de las cél NK en la respuesta innata cuando reconocen ligandos de NKG2D expresados por células infectadas o tumorales, y participa en el perfilado de la respuesta adaptativa hacia un perfil Th1 a través de IFNg secretado.