Caracterización de un antígeno de Trypanosoma cruzi purificado con anticuerpos monoclonales: utilidad diagnóstica y análisis de su inmunogenicidad

ZWIRNER, NORBERTO WALTER; MALCHIODI, EMILIO LUIS; CHIARAMONTE, MÓNICA GRACIELA; MARGNI, RICARDO ANÍBAL; ESTEVA, MÓNICA; FOSSATI, CARLOS ALBERTO

Inmunología (España)

Sociedad Española de Inmunología

Lugar: Barcelona, España; Año: 1992 vol. 11 p. 120 - 127

0213-9626

Por hibridización de esplenocitos de ratones hiperinmunizados con tripomastigotes de Trypanosoma cruzi con células de mieloma NSO se obtuvieron 4 AcMo. Todos reconocen epimastigotes de diferentes cepas y tripomastigotes de T. cruzi. Por inmunoadsorción con el AcMo 20C10 de la fracción F105 de epimastigotes lisados, se obtuvo el Ag20C10 que, por SDS-PAGE e immunoblotting frente a un suero de conejo inmunizado con F105, presenta dos componentes de Mr 46 y 53 kD. Ensayos de unión a concanavalina A revelaron la naturaleza glucoproteica del Ag, mientras que su degradación con periodato inhibió el reconocimiento por el AcMo20C10, sugiriendo que en el epitope están involucrados restos hidrocarbonados.             El análisis de sueros de pacientes chagásicos crónicos con el Ag purificado mostró que el 100% presenta Ac contra el mismo. Por el contrario, 12 sueros de pacientes leishmaniásicos de diferentes regiones de Latinoamérica que presentan reactividad con preparaciones antigénicas crudas de T. cruzi no contienen Ac contra el Ag20C10. Esto lo haría muy útil para distinguir serológicamente entre ambas parasitosis.             Debidoa que el Ag20C10 presenta características similares a las de otro Ag previamente obtenido por nosotros empleando otro AcMo (AcMo163B6), se realizaron estudios inmunoenzimáticos de inhibición de la unión del AcMo163B6 y del AcMo20C10 marcados con peroxidasa, por los mismos AcMo sin marcar. Los resultados obtenidos permiten concluir que ambos Ag son idénticos y que ambos AcMo reconocen el mismo epitope o epitopes solapados. También se encontraron evidencias de la existencia de varios epitopes por molécula de Ag.             Los resultados presentados sugieren, además, que se ha purificado y caracterizado un Ag de T. cruzi muy inmunogénico ya que: 1) utilizando diferentes procedimientos se han obtenido dos AcMo que reconocen el mismo epitope sobre un total de 12 AcMo provenientes de dos hibridizaciones; 2) el 100% de los pacientes chagásicos crónicos presentan Ac contra dicho Ag; 3) se detectaron Ac contra el Ag20C10 en animales de diferentes especies experimentalmente infectados o inmunizados con Ag de T. cruzi.