Efecto inhibitorio de lactobacilos sobre el crecimiento y producción de biofilm de cepas de Klebsiella asociadas a catéteres

SILVA CLARA,; MALDONADO, NATTALIA; MARIA ELENA FÁTIMA NADER; CECILIA MARTA

Tafi del Valle. Tucuman

Jornada; XXII Jornadas Científicas de la Asociación de Biología de Tucumán.; 2005

Sociedad de Biologia de Tucumán

Efecto inhibitorio de lactobacilos sobre el crecimiento y la producción de biofilm de cepas de Klebsiella asociadas a catéteres Silva C,; Maldonado N; Nader ME; Cecilia M CERELA-CONICET. Centro de Referencia para lactobacilos. Chacabuco 145. 4000. S.M. de Tucumán. Argentina. E-mail: fnader@cerela.org.ar Cátedra de Bacteriología. Instituto de Microbiología ? Dr LC Verna? Facultad de Bioquímica Química y Farmacia. UNT Ayacucho 491. E-mail: microbiologiaclinica@fbqf.edu.ar Las infecciones relacionadas con catéteres y otros dispositivos son un verdadero desafío para la prevención y el tratamiento; las terapias no siempre son efectivas debido a los nuevos mecanismos de virulencia desarrollados por los microorganismos; entre ellos la formación de biofilm que es la acumulación de microorganismos y sus productos extracelulares formando una estructura compleja sobre la superficie. Las infecciones asociadas a catéter alcanzan un 40% entre todas alas infecciones nosocomiales y son la fuente mas común de bacteriemias por Gram negativos en pacientes hospitalizados. Para evitar las infecciones asociadas a catéter se aplicaron numerosas y variadas innovaciones tecnológicas: usando lubricantes anti infecciosos, drogas antimicrobianas, modificando materiales del catéter sin lograr resultados positivos. Numerosas investigaciones demuestran el efecto protector que ejercen las bacterias lácticas frente a diversas estrategias y mecanismos. Actualmente, muchas de ellas se usan para prevenir y tratar infecciones clínicas. Por ello en la búsqueda del desarrollo de estrategias efectivas tanto preventivas como terapéuticas el Objetivo de esta trabajo fue: estudiar en Klebsiella aislada de catéteres la inhibición del crecimiento y la formación de biofilm por bacterias del genero Lactobacillus. Materiales y método: Cepas bacterias a) 4 cepas de Klebsiella pneumoniae subesp pneumoniae con alta capacidad de formar biofilm, activadas en caldo Luria por 12 h homogenizadas y con reposo de 15 min. b) 1 cepa de lactobacilo activa cultivada por 12 h en caldo MRS (Rogosa), centrifugada, separándose el sobrenadante en dos partes una se neutralizo con NaOH 8N y la otra se mantuvo con pH ácido; el pellet se dividió en dos partes una se lavo con solución fisiológica y la otra quedo sin lavar. Estudio de inhibición los ensayos se efectuaron en una policubeta estéril. Se colocó en pocillos 150 y 100 ul de cada una de las cepas de Klebsiella y se completo hasta un volumen final de 200 ul con células enteras de lactobacilos lavados y sin lavar y la producción de biofilm se siguió la técnica de O´Toole mediante lecturas de la densidad óptica (DO). A menor producción de biofilm menos DO. Recuento bacteriano se efectuaron en medios selectivos y diferenciales al comienzo y al final de cada una de las experiencias. Resultados: con 50 ul de lactobacilos o sobrenadante +150ul de suspensión de  Klebsiella, se observó disminución de 5 a 11 veces en la DO. Con 100 ul de lactobacilos o sobrenadante y 100 de Klebsiella disminuyó entre 3 y 7 log el crecimiento e inhibió totalmente la formación de biofilm. Conclusión: la inhibición de la formación de biofilm y el crecimiento de cepas de Klebsiella por lactobacilos y su sobrenadante ácido y neutro podría significar un método alternativo, practico y económico  para la prevención de infecciones por bacterias asociadas a catéteres e incentiva a acentuar los estudios como terapia preventiva y así evitar el incremento de capas resistentes a los antimicrobianos.