Fraccionamiento biodirigido de extracto etanólico de Phoradendron liga (Gill ex H.& Arn.) Eich. Su acción frente a hongos patógenos de limón

SELIS DE ORSI, A.N.; SGROI, N.A.; SGARIGLIA, M.A.; SOBERÓN, J.R.; QUIROGA, E.N.; VATTUONE, M.A.

Tucumán (Argentina).

Congreso; XXV Jornadas Científicas de la Asociación de Biología de Tucumán; 2008

Asociación de Biología de Tucumán

Introducción. Los cítricos de Tucumán, en especial los limones están constantemente amenazados por el ataque de microorganismos, en particular por hongos, que producen grandes pérdidas de frutas en poscosecha. El uso de productos químicos nocivos para el ser humano y contaminantes del medio ambiente lleva a investigar sustancias de origen natural, producidas por plantas originarias de nuestra región con propiedades antifúngicas, que permitan el desarrollo de un método de control menos agresivo que los hasta ahora utilizados. En trabajos anteriores se comunicó que el extracto etanólico de Phoradendron liga, especie de la familia Viscaceae, posee esta actividad. Objetivos. En el presente se informa sobre un estudio biodirigido realizado a fin de separar los compuestos responsables de esta propiedad. Materiales y métodos, a) Especie vegetal. Phoradendron liga es una especie de la familia Viscaceae. Planta hemiparásita, muy distribuida en nuestro país, hospeda álamos, algarrobos, acacias, tipas etc. El material vegetal utilizado  parásita un fresno recogido en nuestra ciudad, b) Preparación del extracto. Hojas secas de Ph. liga se trituran en molinillo. Se macera al 10% p/v en etanol 96° a temperatura ambiente durante 72 hs en shaker a 40 ciclos/min. Se filtra y evapora a sequedad en rotavapor. El residuo se redisuelve en volumen determinado de etanol 96°.c) especies fúngicas: Penicillum digitatum, P. expansum, Aspergillus nígery Geotrichum candidum d) Dosaje de Compuestos Fenólicos. Método de Folin Ciocolteau, usando quercetina como estándar, e) Actividad biológica. La actividad antifúngica ¡n vitro se realiza por bioautografía en placa de sílica gel e inhibición zonal con discos a saturación, f) Fraccionamiento de los extractos. 1) A partir del extracto seco de Ph. liga se realiza un fraccionamiento parcial en baten usando éter etílico, dicloro metano y metanol sucesivamente. 2) TLC usando mezcla de solventes: Tolueno/Acetato de etilo/Metanol; 3) Cromatografía en columna (CC) usando Sephadex LH20 (fase móvil: metanol); 4) CC usando Sílica gel (Fase móvil:Tolueno/Acetato de etilo/metanol) Resultados. Del fraccionamiento realizado se comprobó que el extracto obtenido con dicloro metano presenta la actividad antifúngica. La CC en LH 20 de esta fracción permitió separar 3 picos (Fi, F2, Fa). La Fa es la de mayor actividad, determinada por bioautografía. Analizada en CC de sílica gel se obtienen fracciones de escasa actividad. El material retenido en columna se eluyó con metanol en 5 fracciones (Pi-Ps). Por bioautografía e inhibición zonal con discos saturados se observó inhibición del crecimiento de P. digitatum con cuatro de ellas. La de mayor actividad resultó P4. Por TLC seguida de observación con UV corta y larga aparece una zona con actividad antifúngica. Se están realizando distintos revelados para tratar de determinar a qué grupo de compuestos pertenece. Conclusiones. Del extracto alcohólico de Ph. liga se obtuvo una fracción responsable de la actividad antifúngica frente a hongos patógenos de limón. Se continúan los estudios a fin de determinar su estructura