Análisis de genotoxicidad de extractos de Caesapinia paraguariensis (D. Parodi) Burkart

SGARIGLIA, M. A.; SOBERÓN, J. R.; SAMPIETRO, D. A.; QUIROGA, E. N.; VATTUONE, M. A.

Tucumán (Argentina)

Congreso; XXIII Jornadas Científicas de la Asociación de Biología de Tucumán.; 2006

Asociación de Biología de Tucumán

Introducción: La medicina folklórica argentina emplea las plantas en forma de extractos (infusiones, decocciones y tinturas). Estos están constituídos por compuestos químicos de distinta naturaleza y propiedades biológicas. Es importante considerar este aspecto, ya que la sabiduría popular no sospecha de la posible toxicidad de las plantas. En este trabajo investigamos los extractos de ritidoma de Caesalpinia paraguariensis, planta apreciada por sus propiedades vulnerarias, entre otras; en cuanto a su capacidad de dañar el ADN. Cualquier modificación sobre esta molécula es heredable y además conlleva el riesgo de inducir alteraciones que evolucionen hacia procesos tumorales.             El objetivo de este trabajo es evaluar la genotoxicidad en los extractos de C. paraguariensis, mediante un ensayo biológico sensible, rápido con buena aproximación toxicológica y apropiado para ser aplicado a muestras de origen vegetal en vías de purificación biodirigida, permitiendo seleccionar aquellas mas activas y no tóxicas.             Materiales y Métodos: Los extractos (Infusión, Decocción y Tintura), se prepararon según especificaciones de Farmacopea Argentina VI Edición. Se emplearon como sustancias referentes: Dicromato de potasio (K2Cr2O7), Kanamicina y Dimetilsulfóxido (DMSO). Se aplicó el “ensayo rec”, que utiliza cepas isogénicas de Bacillus subtilis, basado en la diferencia relativa de supervivientes entre una cepa proficiente en la reparación del ADN (B. subtilis H17: rec +) y otra cepa deficiente (B. subtilis M45: rec-). Esta diferencia de supervivencias entre rec (+) y rec (-) es interpretada como el resultado de la pérdida del gen recE que media la reparación en la cepa rec (-), cuando interacciona con genotoxinas. Los valores de DO medidos a 595 nm se procesaron para obtener las curvas rec (+) y rec (-). El área encerrada entre estas corresponde a la genotoxicidad de la muestra ensayada. Se aplicó la Transformación Probit para obtener valores numéricos (S-Probit) que permiten evaluar, según cuatro rangos tabulados, el grado de genotoxicidad. Rangos S-Probit: > 0,593 respuesta genotóxica fuerte (++): 0,200 a 0,592: respuesta genotóxica (+); -0,123 a 0,199: no genotóxico (-): <-0,123: efecto reverso (r). Resultados y Conclusiones: Los valores numéricos S-Probit resultantes del ensayo rec: Infusión: -0,320 (r); Decocción: -0.532 (r); Tintura: 2.0 (++). Las sustancias referentes: K2Cr2O7, fuertemente genotóxico, Kanamicina, no genotóxico y DMSO presenta efecto reverso (interpretado como una toxicidad independiente del gen rec), fueron ensayados por este método y los datos bibliográficos se confirmaron experimentalmente: DMSO (r) -0.302; K2Cr2O7 (++): 2,95: Kanamicina (-): 0,137. Esto sirvió de control de calidad de la técnica para la evaluación de Genotoxicidad en nuestras muestras.             Según los datos aportados por el ensayo rec, los extractos acuosos (Infusión y Cocimiento) no conllevan riesgo genotóxico, a diferencia de la tintura que si presenta una fuerte genotoxicidad in vitro, por lo que se desaconseja el empleo de esta forma extractiva a partir del ritidoma de la especie en estudio, como medicinal.             Los resultados obtenidos explican la importancia de realizar pruebas toxicológicas cuando se investigan nuevas sustancias bioactivas a partir de plantas medicinales.