Evaluación de la actividad depuradora de radicales libres de compuestos purificados de Tripodanthus acutifolius (Ruiz & Pavón) Van Tieghem

SOBERÓN, J. R.; SGARIGLIA, M. A.; SAMPIETRO D. A.; QUIROGA E. N.; VATTUONE, M. A.

Tucumán (Argentina)

Congreso; XXIV Jornadas Científicas de la Asociación de Biología de Tucumán.; 2007

Asociación de Biología de Tucumán

Introducción: Los radicales libres son moléculas altamente reactivas generadas continuamente durante el metabolismo celular. Existen sistemas depuradores endógenos que impiden la proliferación de dichas especies. Bajo ciertas circunstancias, la producción de radicales libres excede a la depuración, generando un desbalance conocido como estrés oxidativo, que implica daños peroxidativos a lípidos de membrana, alteración de proteínas y daños a nivel de los ácidos nucleicos. Algunos reportes indican una alta correlación entre la proliferación de radicales libres y el envejecimiento celular prematuro y el desarrollo de múltiples patologías (procesos inflamatorios, artritis, diabetes, enfermedades neurodegenerativas, etc.). Se ha sugerido que la administración de sustancias depuradoras exógenas (antioxidantes) prevendría o retrasaría estos efectos nocivos. La reconocida toxicidad de los antioxidantes sintéticos como el hidroxitolueno butilado (BHT) o el hidroxianisol butilado (BHA) hace necesario encontrar estructuras alternativas para tales fines. En este aspecto, la búsqueda de metabolitos bioactivos de origen vegetal constituye un tópico de gran interés en la investigación. Objetivos: El presente trabajo evalúa la actividad depuradora de radicales libres de 5 metabolitos aislados a partir de la infusión de hojas de Tripodanthus acutifolius (Ruiz & Pavón) Van Tieghem, una especie hemiparásita de uso medicinal en el  noroeste argentino.  Materiales y métodos: Se realizó una purificación (guiada por la actividad depuradora de radicales libres) de metabolitos a partir de la infusión de T. acutifolius mediante sucesivos fraccionamientos por extracción con solventes, cromatografía en columna y HPLC. Los compuestos se identificaron por técnicas cromatográficas (coinyección con patrones en HPLC) y espectroscópicas (UV-Visible y RMN). La actividad depuradora de radicales libres se evaluó  mediante los ensayos de reducción del radical libre 1,1`-difenil-2-picrilhidrazilo (DPPH), ensayo de la deoxiribosa (que evalúa la depuración del radical hidroxilo) y la  inhibición de la peroxidación lipídica en membranas de glóbulos rojos humanos. En cada ensayo se determinaron las concentraciones depuradoras 50 (CD50). La actividad de los metabolitos se comparó con la de antioxidantes reconocidos (quercetina, kaempferol, ácido ascórbico, manitol, BHT).  Resultados: Cuatro compuestos purificados fueron glicoflavonoides: rutina, nicotiflorina isoquercitrina e hiperósido. Se aisló un quinto metabolito no descrito aún en la bibliografía: 4-(3`,4`-dihidroxi) fenil-2-β-D-glucofuranosilbutano (DHGB). DHGB fue el más activo de los metabolitos purificados en el ensayo de reducción del DPPH y en la inhibición de la peroxidación lipídica (CD50 = 3,4 y 120 ppm respectivamente). BHT fue el menos activo de los antioxidantes de referencia en la reducción del DPPH (CD50 = 48 ppm). Hiperósido e isoquercitrina presentaron la mayor actividad depuradora del radical hidroxilo (CD50 = 100 ppm). Conclusiones: Rutina, nicotiflorina, isoquercitrina e hiperósido son conocidos depuradores de radicales libres. DHGB no había sido aislado en ninguna otra especie. La presencia de hidroxilos fenólicos en estos compuestos sería la responsable de la actividad depuradora de radicales libres. T. acutifolius representa una fuente natural de estos metabolitos.