Elucidación de dos nuevas saponinas triterpénicas de Anagallis arvensis L. aplicando UHPLC-MS/MS y RMN

PASTORIZA, A. C.; SOBERÓN , J.R.; SGARIGILA, M. A.

San Luis

Congreso; IV Congreso Argentino de Espectrometria de masas; 2022

Sociedad Argentina de Espectrometria de masas (SAEM)

Anagallis arvensis L. es una planta conocida popularmente como 'pimpinela escarlata', está distribuida en todo el mundo1, y debido a sus diversas propiedades medicinales viene cobrando interés creciente. Varios estudios han demostrado que las saponinas triterpénicas (STs) son los principales metabolitos secundarios (MS ≥ 70% p/p) de A. arvensis2,3, las cuales han mostrado interesantes actividades biológicas como antifúngicas4. Sin embargo, la identificación química completa de estos fitoquímicos continúa siendo objeto de estudio, ya que la alta polaridad y la similitud estructural, dificulta el aislamiento, por ello consideramos la aplicación de cromatografía líquida de ultra-eficiencia acoplada a espectrometría de masas con analizador Q-TOF como una herramienta valiosa para el análisis de componentes de fitocomplejos por su alto poder de resolución.A partir del extracto etanólico, de hojas y ramas de A. arvensis, seco, separamos las saponinas agregando acetona, basados en su solubilidad diferencial respecto de otros MS. La fracción enriquecida en saponinas triterpénicas (FSTs) fue caracterizada por: test de Lieberman Bouchard, poder afrógeno, actividad hemolítica y CCF revelado con p-AS, y fue analizada por UHPLC-ESI-QTOF-MS/MS. Posteriormente se hidrolizó FSTs, y se separó la fracción de agliconas para ser analizada por RMN 1 y 2D (en DMSO-d6).El análisis cromatográfico realizado permitió separar nueve saponinas monodesmosídicas derivadas del ácido oleanólico, siete de las cuales ya fueron identificadas previamente2,3. La comparación con estructuras ya elucidadas, de los espectros de masas generados y consultados en bases de datos (PubChem, 2004–2022), nos permitieron detectar dos STs nuevas para esta especie, 3: 3-O-{β-D-glucopiranosil (1→4)-[β-D-xilopiranosil (1→2 )]-β-D-glucopiranosil (1→4)-[β-D-glucopiranosil (1→2)]-α-L-arabinopiranosil}-13β, 28- epoxi- 22 acetil- 28 metoxi-16α, 24-oleananodiol y 4: 3-O-{β- D-glucopiranosil (1→4)-β-D-glucopiranosil (1→4)-[β-D-xilopiranosil (1→2)]-β-D-glucopiranosil (1→4)-[β-D-glucopiranosil (1→2)]- α-L-arabinopiranosil}-13β, 28-epoxi-16α, 30-oleananodiol. El análisis por 13C- RMN y HMBC permitió determinar las diferencias estructurales claves en la aglicona del compuesto 3.Este trabajo permitió avanzar en la caracterización química de las saponinas triterpénicas de A. arvensis, acelerando el descubrimiento de nuevos compuestos y potenciales fármacos a partir de las mismas, y aportando experiencia en la utilización de recursos analíticos combinados (UHPLC-ESI-QTOF-MS/MS y RMN) para la identificación más rápida de saponinas triterpénicas en extractos de plantas.