Actividad inmunomoduladora y citotoxicidad de deriva-dos elágicos aislados de Caesalpinia paraguariensis(Burkart), sobre cultivo de macrófagos humanos activados

SGARIGILA, M. A.; SOBERÓN , J.R.; PASTORIZA, A. C.; IRIARTE, M.L; SAMPIETRO D. A.

VIRTUAL

Simposio; XVIII SImposio Latinoamericano de Farmacobotánica; 2022

FFyB-UBA \ UMAI

C. paraguariensis es un árbol autóctono, conocido en Argentina como ?guayacán?, está distribuido en la fitorregión chaqueña, extendiéndose hacia países limítrofes como Bolivia y Paraguay. La corteza es usada popularmente como infusión medicinal para mejorar la diabetes y la aterosclerosis, entre otras aplicaciones. En estudios previos, hemos determinado por ensayos in vitro, que sus actividades antioxidante e inhibitoria de enzimas inflamatorias se debe a la presencia de compuestos identificados como lactonas fenólicas derivadas del ác. elágico. En este trabajo evaluamos la actividad inmunomoduladora y citotoxicidad de una fracción enriquecida en estos compuestos (5M1), sobre un modelo de cultivo de macrófagos humanos activados. 5M1 fue caracterizada y cuantificada por HPLC (C18) analítico, empleando estándares internos (5M1: 3,3? di-O-metilelágico-xilopiranósido (4,5 mg/mL), 3-O-metilelagico (1,13 mg/mL), 3,3? di-O-metilelágico (0,15 mg/mL), fisetina (2,0 mg/mL). Modelo celular: línea pro-monocítica U937 (ATCC) diferenciada a macrófagos (U937dif) en medio completo (MC: RPM1 1640 con glutamina, 10 % SFB) y PMA; los ensayos se realizaron en policubetas de 24 pocillos (105 cels/mL; Vf: 1 mL), incluyendo 10 µL de 5M1 en MC con LPS (1 µg/mL), ac. Elágico (AE), y controles correspondientes. La citotoxicidad se evaluó según la actividad metabólica por MTT (570 nm) post-24 hs de exposición a 5M1 (1, 5 y 10 µL), e incubación a 37 °C 5 % CO2, y la integridad de membrana por tinción con Tripan blue en hemocitómetro. La concentración de IL-1βse determinó en kit ELISA a 450 nm (R&D Systems, Inc. USA) empleando los sobrenadantes de cultivos con tratamientos 5M1 (1, 5 y 10 µL), AE, y controles. 5M1 inhibió la producción de IL-1βde manera concentración dependiente (31 % I = 8 µg/mL; 45 % I = 40 µg/mL; 56 % I = 80 µg/mL); el control positivo (AE) alcanzó 65 % I con 10 µg/mL, sin superar este porcentaje con mayores concentraciones. No se evidenció citotoxicidad según actividad metabólica, ni afectación de membranas, bajo las condiciones ensayadas. Considerando el rol inflamatorio clave de la IL-1β, que afecta todas las instancias de aterogénesis (formación, mantenimiento y ruptura de placa), y en la diabetes tipo 2, la inhibición de 5M1 sobre la secreción de esta interleuquina en macrófagos U937dif. contribuye con la validación de los usos medicinales atribuidos a la planta, y alienta el estudio de 5M1 sobre otros blancos inflamatorios vinculados a sus propiedades medicinales