INVESTIGADORES
CAZORLA Silvia Ines
congresos y reuniones científicas
Título:
Actividad de Tc52 y Cruzipaína sobre receptores de reconocimiento de patrones (RRPs); y de Tc52 y sus dominios en células presentadoras de antígeno (CPA).
Autor/es:
MATOS, M; CAZORLA, S; EBENSEN T; CABRERA A; GUZMAN C; MALCHIODI E
Reunión:
Congreso; Reunión anual SAI-SAIC 2012; 2012
Resumen:
Tc52 es una proteína de T. cruzi
con actividad glutatión transferasa, que posee dos dominios con alta homología.
Cruzipaína (Cz) es una proteasa de T.
cruzi involucrada en la invasión celular
que posee dos dominios diferenciados. Estudiamos la capacidad de unión de las
recombinantes Tc52, Cz y sus dominios sobre diferentes PPRs, utilizando células
HEK-blue (Invivogen). Todas ellas fueron capaces de unirse a TLR2, activando la
expresión del gen reportero. Tc52 y sus dominios unieron TLR9, no asi Cz ni sus dominios. Además, Tc52 y C-term unieron TLR8, pero no N-term ni Cz y
sus dominios. Ninguna de las proteínas ensayadas unió NOD1, NOD2, TLR5 ni TLR3.
Estudiamos la actividad de Tc52 y sus dominios sobre células
dendríticas (CD) extraídas de médula ósea de ratones. Las CD fueron coincubadas con ovoalbúmina (OVA) y Tc52 o sus
dominios y evaluamos su capacidad de procesar y presentar péptidos de OVA y
activar la proliferación de linfocitos T obtenidos de ganglios linfáticos de
ratones C57/BL6 OTI y OTII, que poseen células T CD8+ y CD4+ específicas para
OVA, respectivamente. Observamos mayor índice de proliferación en linfocitos
estimulados con CD pretratadas con OVA+Tc52 o sus dominios, respecto a los
estimulados con CD pretratadas únicamente con OVA. El efecto fue mayor con Tc52
entera respecto a cada uno de sus dominios, sin diferencias significativas
entre ellos. Macrófagos de la línea Raw264.7, incubados con Tc52 y sus dominios
produjeron niveles de nitritos bajos pero apreciables y significativamente diferentes
de los controles (p<0.05), que no se modificaron al agregar Polimixina B a
las proteínas.
Estos resultados sugieren que en la infección por T. cruzi, Cz induciría en las
células la transducción de señales a
través de TLR2, mientras Tc52 lo haría a través de TLR2, TLR9 y TLR8. Además, Tc52
es capaz de activar CPA promoviendo la presentación antigénica en CD y la activación
de células T; y la producción de óxido nítrico en macrófagos.