Respuesta inmune contra Tc52 y sus dominios N- y C-terminales inducidas por c-di-AMP y a-GCPEG como adyuvantes intranasales

MATOS M, CAZORLA SI, SCHULZE K, WEISSMANN S, GUZMAN C, MALCHIODI E

Congreso; Reunión anual SAI-SAIC 2012; 2012

Tc52 es una proteína de T. cruzi con actividad glutatión transferasa, vital para el parásito. Previamente demostramos que el ADN de Tc52 y sus dominios N- y C-term, transportados por Salmonella atenuada, generaban una respuesta protectora. En este trabajo estudiamos la respuesta inmune desarrollada por Tc52 y sus dominios utilizando como adyuvante bis-(3',5')-cyclic dimeric adenosine monophosphate (c-di-AMP) comparando con inmunizaciones de N-term + ODN-CpG. Los ratones C3H se inmunizaron por vía intranasal con 3 dosis. Postinmunización se tomaron muestras de suero, lavado ocular, lavado nasal, saliva y se extrajo el bazo y los ganglios linfáticos drenantes. Los grupos inmunizados con adyuvantes desarrollaron respuesta inmune específica con títulos muy altos de IgG anti-Tc52 en suero y de IgA anti-Tc52 en mucosas. Así mismo, estos grupos desarrollaron una respuesta inmune celular específica en ganglios linfáticos y esplenocitos que proliferaron en presencia de Tc52 (determinado por incorporación de 3H-timidina, índice de proliferación >2, p<0.05). En esplenocitos, por ELISPOT, se determinó el número de células secretoras de IL-4, IFN-g e IL-17 en presencia de Tc52. Todos los grupos presentaron bajo número de células productoras de IL-4 y alto número de células IFN-g+, sin diferencias significativas entre ellos. Sin embargo, solo los grupos inmunizados con c-di-AMP presentaron alta respuesta de IL-17+ comparado con el grupo inmunizado con N-term + CpG-ODN. Adicionalmente, otro grupo se inmunizó con N-ter y α-galactosilceramida PEGilada (a-GCPEG) junto a c-di-AMP. Encontramos que la a-GCPEG impide el aumento de células productoras de IL-17 inducida por c-di-AMP. Se concluye que los grupos inmunizados con las proteínas recombinantes desarrollaron una respuesta inmune específica frente a Tc52, siendo el patrón de la misma altamente dependiente del adyuvante. Se están llevando a cabo los estudios de inmunoprotección frente a la infección con estos adyuvantes.