Desarrollo de un metodo para evaluar activiada Tripanocida y leishmanicida de Plantas Medicinales Argentinas

FRANK F, CAZORLA SI, SULSEN V, REDKO F, ULLO J, COUSSIO J, MALCHIODI E, MUSCHIETTI L, MARTINO V

Huerta Grande, Córdoba, Argentina

Congreso; XXI Reunion Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2006

Los medicamentos empleados actualmente para el control de la enfermedad de Chagas y Leishmaniasis tienen alta toxicidad, baja actividad y resistencia emergente. La ausencia de drogas nuevas hace que la búsqueda de agentes activos sea prioritaria. El objetivo del siguiente trabajo fue desarrollar un método práctico para evaluar la actividad tripanocida y leishmanicida de plantas usadas en la medicina tradicional argentina. Los parásitos fueron cultivados durante 16hs en 150 ul de medio LIT, en presencia de 1 uCi de Timidina-H3 (Amersham). Las cuentas por minuto incorporadas se determinaron en un contador beta. Se cultivaron epimastigotes de T. cruzi en distintas concentraciones (desde 107 hasta 103 parásitos/ml), obteniéndose linealidad entre cpm y parásitos/ml (r2>0,99).  Se cultivaron a distintos tiempos 1,5x106p/ml en presencia de Benznidazol (5 a 20 uM), con el agregado T-H3 en las últimas 16hs, dando el recuento en cámara de Neubauer vs cpm una correlación significativa (P<0,03). Se verificó la actividad de Amfotericina B (0,025 a 0,2 ug/ml) sobre Leishmania mexicana, y se corroboró una inhibición de la proliferación dosis dependiente para ambas especies. La incorparación de T-H3 mostró ser un método sensible, rápido, certero e independiente de la cepa  para el screening de drogas. De los extractos orgánicos de Ambrosia tenuifolia y Eupatorium buniifolium se aislaron los flavonoides: hispidulina y santina, con valores de IC50 de 14,00 y 16,79 ug/ml para T. cruzi y de 2,09 y 22,08 ug/ml para L. mexicana, siendo hispidulina el compuesto más activo encontrado. Mediante el método desarrollado se determinó por primera vez la actividad tripanocida y leishmanicida de estos compuestos.