El dominio catalítico de la cruzipaína es el responsable de la generación de una respuesta inmune protectiva frente a Trypanosoma cruzi

CAZORLA SI, FRANK FM, CORRAL RS, MALCHIODI EL

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; LII Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica. LV Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología. Sociedad Argentina de Fisiología; 2007

Previamente demostramos que Cruzipaína (Cz) nativa junto a ODN-CpG es capaz de generar una respuesta protectiva frente al desafío con T. cruzi. Cz está constituída por dos dominios: el NH2-terminal con actividad enzimática, y el COOH-terminal, inmunodominante. Considerando los fenómenos de autoinmunidad, nuestro objetivo fue identificar la menor porción de Cz capaz de generar una respuesta protectiva. Para ello clonamos y expresamos las proteínas recombinantes, e inmunizamos ratones con: GI- PBS, GII- rNH2+CpG, GIII- rCOOH+CpG, GIV- rCz+CpG. Se detectaron niveles de IgG (principalmente IgG2a) anti-Cz en GIII (1,5x104) y GIV (1,3x104) > GII (844,6). Se observó una fuerte respuesta proliferativa in vivo (DTH) e in vitro (proliferación) en el GII (P<0.01). GII y GIII presentaron niveles significativos de IFN-γ (89 y 160 pg/ml, respectivamente). Al desafiar con tripomastigotes, se encontró disminución de la parasitemia, principalmente en el GII (P<0.01). Luego de la fase aguda de la infección, esplenocitos reestimulados in vitro con una mezcla de Ag del parásito, presentaron un incremento significativo en la secreción de IFN-γ (1110 pg/ml) e IL-10 (1448 pg/ml) mostrando el establecimiento de una fuerte respuesta Th1. En la fase crónica de la infección la actividad de CPK, LDH y ASAT (enzimas marcadoras de daño muscular), fueron significativamente menores en el GII que en el grupo control, coincidiendo con el análisis histológico de tejido cardíaco. Concluimos que la inmunización con el dominio catalítico de Cz logró generar una eficiente respuesta inmune capaz de disminuir la parasitemia y el daño muscular producido por la infección. Adicionalmente, determinamos que en el GIV la respuesta inmune humoral y celular está dirigida mayoritariamente contra el COOH terminal, lo que sería un mecanismo de escape del parásito que orientando la respuesta inmune contra este fragmento no activo de la proteína.