Estudio de las alteraciones inducidas en queratinocitos humanos por la exposición a nanopartículas de cobre biosintetizadas

LOPEZ VENDITTI, ELIANA; BUSTOS, PAMELA SOLEDAD; CALIENNI, MARÍA NATALIA; MONTANARI, JORGE; PÁEZ, PAULINA LAURA; PARAJE, MARÍA GABRIELA; GUIÑAZÚ, NATALIA

Congreso; XXII CONGRESO ARGENTINO DE TOXICOLOGÍA; 2021

Asociación Toxicológica Argentna

Las nanopartículas metálicas ?NPs? (1-100 nm), poseen una importante actividad microbicida con múltiples aplicaciones biomédicas, en las que se incluyen el uso tópico como antisépticos. Las NPs de cobre además de las propiedades antibacterianas, poseen propiedades eléctricas, catalíticas y termales. Estas NPs pueden ser producidas por biosíntesis mediada por microorganismos como bacterias y hongos. Sin embargo, su posible aplicación para uso humano requiere de estudios de toxicidad que demuestren su inocuidad, por tanto el objetivo del presente trabajo fue investigar la toxicidad de NPs de cobre (CuNP) biosintetizadas por bacterias, en una línea celular humana de queratinocitos HaCaT. Las CuNP se biosintetizaron utilizando Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853), se caracterizaron por espectroscopía UV-Vis y por microscopia electrónica de transmisión (TEM). Las células HaCat se incubaron por 4 y 24 h a distintas diluciones de CuNP ([CuNP]/10, [CuNP]/5, [CuNP]/2). Se realizaron los controles con RPMI 1640 5% SBF, la sal del metal precursor a 0,1 y 0,25 mM (CuSO4) y control de crecimiento bacteriano de biosíntesis (CCB). Se evaluó la viabilidad celular por MTT, cristal violeta (CV) y rojo neutro (RN). Se analizaron los niveles de especies reactivas de oxigeno (ERO) mediante el ensayo con DCF-DA, anión superóxido mediante NBT y los niveles de óxido nítrico (ON) por la reacción de Griess. Se determinó la actividad de superóxido dismutasa (SOD) por técnicas bioquímicas. Se analizó la migración celular con el ensayo de herida. Las CuNP biosintetizadas presentan un tamaño de ≈15,8 nm y forma esférica. Los ensayos de toxicidad indicaron que la viabilidad celular se vio alterada significativamente por [CuNP]/2 (4 h: p0,001, 24h: p