INVESTIGADORES
PERONE Marcelo Javier
congresos y reuniones científicas
Título:
Los glucocorticoides inhiben la expresión de interleuquina-17A, principal citoquina efectora del linaje de linfocito T de ayuda 17
Autor/es:
ANTUNICA NOGUEROL, M; APRILE GARCIA, F; CASTRO, CN; BARCALA TABARROZI, AE; PERONE, MJ; LIBERMAN, AC; ARZT, E
Reunión:
Congreso; LVI Reunion Anual de SAIC; 2011
Resumen:
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Los glucocorticoides (GCs) son ampliamente
utilizados en el tratamiento de enfermedades inflamatorias y autoinmunes dado
su efecto anti-inflamatorio e inmunosupresor. Recientemente se ha identificado
un nuevo linaje de linfocito T de ayuda (Th), Th17, implicado en la patogénesis
de enfermedades autoinmunes. El factor de transcripción (FT) maestro de este
linaje y principal responsable de la producción de su citoquina característica,
interleuquina (IL)-17A, es RORγt. Dado que IL-17A está asociada al desarrollo
de enfermedades autoinmunes e inflamatorias, nuestro objetivo es estudiar el
efecto de los GCs sobre la producción de esta citoquina y en particular sobre
la actividad transcripcional de RORγt con el fin de caracterizar el mecanismo
molecular involucrado en la regulación de su actividad e identificar posibles
blancos terapéuticos.
Estudiamos el efecto del GC sintético
dexametasona (Dex) (10-100nM) sobre la actividad del promotor de IL-17A en
ensayos reporteros en la línea de linfoblastoma T murino, EL4, que expresa
RORγt endógeno. Evaluamos el mecanismo molecular involucrado utilizando el
inhibidor de histona-deacetilasas (HDACs) tricostatina A (TSA) (1uM).
Analizamos la interacción entre el GR y RORγt mediante ensayos de
coinmunoprecipitación. Evaluamos la expresión de IL-17A en presencia de Dex por
qPCR.
Observamos
que Dex inhibe la actividad del promotor mínimo de IL-17A clonado río abajo del
enhancer CNS-2 (50%, p<0.01), fuertemente regulado por RORγt. Esta
inhibición se revierte en presencia del inhibidor de HDACs, TSA. También
demostramos que el GR interactúa con RORγt. Observamos que Dex inhibe la
expresión de IL-17A en cultivos primarios de esplenocitos tratados con
concanavalina A (ConA) (2.5ug/ml) (50%, p<0.01) y en la línea celular EL4
(27%, p<0.01). Concluimos que los GCs inhiben la actividad del promotor y
expresión de IL-17A. El mecanismo molecular involucrado estaría mediado por
interacción del GR con el FT clave, RORγt, y el reclutamiento de HDACs.