POLIMEROS CATIONICOS COMO AGENTES DE TRANSFECCION EN FIBROBLASTOS FETALES BOVINOS

D. FORCATO; F. ALUSTIZA; A. FILI; A. ALESSIO; F. OLMOS NICOTRA; N. RODRIGUEZ; S. BONGIOVANNI ABEL; J. LAZARO MARTINEZ; C. A. BARBERO; P. BOSCH

La Falda

Congreso; XIX Annual Scientific Meeting CORDOBA BIOLOGY SOCIETY; 2013

El objetivo fue evaluar la eficiencia de transfección y la toxicidad de los polímeros catiónicos polialilamina (PAA) y polietilenimina (PEI) en cultivos de fibroblastos fetales bovinos (FFB). Las células fueron sembradas a una concentración de 3 × 104 células en placas de 24 pocillos con DMEM/10% SFB. Diferentes relaciones de PAA y PEI/ADN plasmidico (plásmido pZsGreen1) fueron ensayadas (2:1, 1:1 p/p). El porcentaje de células que expresaron la proteína verde fluorescente (GFP) se midió por citometría de flujo 48 h postransfección. La viabilidad celular fue determinada mediante MTT. Se halló un mayor porcentaje de células GFP positivas con la proporcion 2:1 PEI:ADN comparado con 1:1, usando 1μg de ADN (38.4±1.9% vs 13.5±1.4%). Duplicar la [ADN] no mejoró la eficiencia de transfección (38.4±1.9% vs 32.4±1.9%). El ensayo de MTT mostró una notable muerte celular a 2 y 4 μg PEI (54.7 ± 3.4% y 18.5 ± 5.7% de células viables, respectivamente). La transfección con 0.5 y 1 μg/pocillo de PAA fue marginal (menos de 3% de células GFP positivas). Usando 2 μg ADN/2ug de polímero, el porcentaje de células positivas con PAA fue significativamente menor que con PEI (12.7±1.3 vs 32.4±1.9). Estos resultados indican que PEI es superior a PAA como agente de transfección en FFB.