CAMBIOS EN EL ESPECTRO DE ABSORCIÓN DE LA HEMOLINFA DE Spodoptera frugiperda CON LA ACTIVIDAD DE LA FENOLOXIDASA

MEDINA PEREYRA P. MURÚA MM GG NAVARRO F F F. Y FERNÁNDEZ F. M

Tafí del Valle

Jornada; XXVII Jornadas Científicas, Asociación de Biología de Tucumán; 2010

Asociación de Biología de Tucumán

El sistema de la profenoloxidasa (PPO) es uno de los principales, y más complejos,  mecanismos de defensa presentes en la hemolinfa (HL) de los insectos. Se activa espontáneamente ante un daño tisular y produce la formación de difenoles y compuestos activos del oxígeno en la HL que llevan a la anulación de la noxa y a su melanización. Esto se traduce en el oscurecimiento de la hemolinfa en minutos. No hemos encontrado trabajos sobre la variación, espontánea y en ausencia de sustratos externos, del espectro de absorción (EA) de la HL al activarse la PPO. Nuestro objetivo fue medir los cambios que acaecen en el EA al activarse la enzima en la HL de Spodoptera frugiperda. Se utilizaron pupas y larvas del último estadío. La HL se diluyó con buffer y se determinó su EA entre 290 nm y 1050 nm a lapsos regulares > 1 hora. Los resultados mostraron: a) una notoria mayor actividad en la HL de las pupas respecto a larvas; b)  aumentos y disminuciones en la absorbancia que se pueden resumir en variaciones sostenidas y breves. Entre las primeras: los incrementos regulares que se producen en picos de ≈297 y ≈306 nm, correspondientes a productos de la actividad de la fenoloxidasa sobre la dihidroxifenilalanina; una banda ancha que se extiende entre los ≈500 a los ≈850 nm, con un pico a los ≈600 nm, que corresponde a los polímeros de melanina, evidenciada desde los primeros minutos, con crecimiento constante; la disminución leve y sostenida de la absorbancia en el infrarrojo cercano. Las variaciones breves se evidenciaron solamente en los primeros minutos de las observaciones y fueron de poca intensidad. c) variaciones individuales; d)  notorias diferencias según que las muestras de HL hayan sido centrifugadas ó no. Las observaciones generales sobre los picos individuales del espectro de absorción resultante de la actividad de la fenoloxidasa  son coincidentes con la información bibliográfica concerniente a los efectos de la PPO sobre sustratos externos en insectos. Además de lo expuesto, se evidencia que éste constituye un método óptimo para evidenciar  funciones de PPO en este género de insectos.