Diseño de nanopartículas inmunogénicas constituidas por epitopes de toxinas de arácnidos para la producción de antivenenos

RODRÍGUEZ, JÉSICA A.; IGLESIAS-GARCÍA, LUCÍA C.; BARREDO VACCHELLI, GABRIELA R.; BIROCCO, ARIADNA; BLACHMAN, AGUSTÍN; CALABRESE, GRACIELA C.; CAMPERI, SILVIA A.

Workshop; Workshop internacional de la Facultad de farmacia y bioquímica UBA; 2022

Existen en Argentina especies de arácnidos de importancia médica capaces de provocar envenenamiento en humanos, afectando principalmente el sistema cardiovascular y pulmonar. Para su tratamiento,se administran antivenenos cuya producción requiere la captura de los arácnidos y la extracción desus venenos por electroestimulación, un método engorroso, peligroso y de bajo rendimiento. Dichosvenenos son luego inyectados en caballos para la producción de sueros antivenenos. Gran parte delos compuestos responsables de los síntomas de envenenamiento por arácnidos son péptidos con grancantidad de puentes disulfuro altamente estables y difíciles de degradar por las células presentadorasde antígenos (péptidos con nudos de Cys) por lo que son poco inmunogénicos.En el presente trabajo, utilizando la herramienta “MHC-II Binding Predictions” del “Immune EpitopeDatabase Analysis Resource”, se identificaron los epitopes de las principales toxinas responsablesdel envenenamiento causado por Phoneutria nigriventer y Tityus trivittatus. Los epitopes identificados se sintetizaron en fase sólida usando química Fmoc/tBu. Para aumentar la inmunogenicidad delos pequeños péptidos, se desarrollan nanopartículas de manera de aumentar su tamaño utilizandoestrategias alternativas: a) péptidos ramificados (dendrímeros) y b) péptidos lineales y ramificadosunidos a ácidos grasos.Se estudió la pureza, identidad y citotoxicidad de los péptidos sintetizados. Su pureza y correcta síntesis fue verificada por RP HPLC y ESI MS, donde las m/z de los picos obtenidos correspondieron alos péptidos sintetizados. La citotoxicidad de los péptidos fue estudiada sobre la línea de monocitosde ratón (Raw 264.7) evaluando la actividad de la 4-succinato dehidrogenasa (ensayo de MTT), demostrándose su falta de toxicidad.Sobre la base de los resultados obtenidos se realizarán los estudios de activación de monocitos paraevaluar su inmunogenicidad relativa con el objetivo de desarrollar inmunógenos adecuados para laproducción de antivenenos a gran escala y así satisfacer las demandas a nivel nacional y regional.